摘要:

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摘要:酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae细胞表面展示表达系统是一种固定化表达异源蛋白质的真核展示系统，具有糖基化作用及蛋白翻译后折叠等优势，更利于基因工程操作。近年来，酵母细胞表面工程作为一种新兴策略来固定化淀粉水解酶、纤维素水解酶以及木聚糖降解酶，从而应用于燃料乙醇的生产。文中着重介绍了酵母细胞表面展示系统的基本原理、研究现状以及在生物乙醇生产中的应用前景及所面临的挑战。

摘要:自噬作用是一种细胞通过溶酶体自我降解的过程，在肿瘤的形成和发展中起着双重作用。窖蛋白-1?(Caveolin-1，Cav-1) 作为胞膜窖的标志蛋白，介导许多生理和病理过程，包括胞膜窖的形成、膜泡运输、维持细胞胆固醇稳态、信号转导和肿瘤的发生。近年来，许多研究表明肿瘤细胞自噬和Cav-1存在一定关系。文中就近年来肿瘤细胞的自噬与Cav-1的关系及其在肿瘤发生和发展过程中的作用进行综述。

摘要:肌肉生长抑制素 (Myostatin，Mstn) 是转化生长因子-β超家族的成员，在哺乳动物的骨骼肌生长和分化过程中起负调控作用，其转录调控受到多个基因的影响，其中肌肉增强子因子2 (MEF2) 是重要的调控因子之一。因此，对猪Mstn启动子上MEF2位点及其作用方式的探讨具有重要意义。首先，通过PCR方法扩增了猪Mstn基因上游1 969 kb的启动子序列，利用生物信息学方法分析该序列包含3个MEF2的结合位点；其次，采用逐步删除的方法获得5个长度不等的启动子，用荧光素酶报告系统评估了它们在小鼠成肌细胞

摘要:为阐明miR-103在猪前体脂肪细胞分化过程中的调控作用，采用Real-time PCR检测猪前体脂肪细胞成脂分化过程中的miR-103表达谱，明确了其在分化过程中的表达趋势；使用miR-103的腺病毒超表达载体感染猪原代脂肪细胞，随后采用Real-time PCR和Western blotting分别检测成脂标记基因PPARγ、aP2的mRNA和蛋白表达量变化；油红O染色观察腺病毒miR-103侵染的前体脂肪细胞诱导分化第8天的成脂情况。结果显示，miR-103的表达量随着脂肪细胞分化而增加，在miR-

摘要:为了提高重组毕赤酵母生产碱性果胶酶 (Alkaline polygalacturonate lyase，PGL) 的比速率，开发了一种新的恒细胞密度发酵策略。通过不同的甲醇流加方式，实现发酵过程细胞密度的合理控制。实验结果表明：控制细胞密度为75 g/L的策略为最优，最终单位发酵液体积生产强度和单位菌体生产强度为6.11 U/(mL·h) 和81.5 U/(g·h)，分别比传统高密度发酵提高了42.1％和191.2％，最终PGL酶活为441.9 U/mL。此外，该策略还具有提高细胞活性和降低蛋白酶降解作用

摘要:JadH是羟化脱水双功能酶，参与杰多霉素生物合成中的聚酮后修饰反应，将2,3-dehydro-UWM6催化为dehydrorabelomycin。为了分析杰多霉素生物合成途径中后修饰氧化酶JadH结合、催化底物的关键氨基酸，构建了JadH与底物复合物的三维结构模型。利用该模型并结合JadH同源蛋白氨基酸序列比对分析，推测出JadH活性中心中可能参与底物结合或催化的关键氨基酸 (R50、G51、L52、G53、F100、R221、I223、P295和G298)。通过定点突变及体外酶学实验对这些位点的突变体的

摘要:斜卧青霉Penicillium decumbens T.是1种重要的产纤维素酶丝状真菌，能有效地降解利用木质纤维素生产第2代生物燃料。为了提高斜卧青霉纤维素酶的产量，构建了去泛素化酶基因creB的敲除盒，并通过同源双交换重组的方法，获得了creB基因缺失突变株ΔcreB。该突变株呈现明显的纤维素酶表达分泌抗葡萄糖代谢阻遏效应，ΔcreB菌株的滤纸酶活、内切纤维素酶活、木聚糖酶活以及外切纤维素酶活分别提高1.8倍、1.71倍、2.06倍以及2.04倍，其胞外蛋白质含量提高了2.68倍。确定了creB基因缺失

摘要:以重组海洋细菌漆酶Lac15 (rLac15) 为生物催化剂，对蒽醌类和偶氮类染料进行脱色，考察了rLac15对人工合成纺织染料的脱色潜能。通过研究催化的介体、酶量、pH、染料浓度以及温度对脱色效率的影响，进一步优化了rLac15对部分蒽醌类和偶氮类人工合成纺织染料的脱色条件。以丁香酸甲酯为介体，在pH 8.5、45 ℃条件下反应1 h，20 U/L rLac15对100 μmol/L偶氮染料类Acid Red 6B (AR-6B)，Reactive Blue 194 (M-2GE)，Reactive B

摘要:梅Prunus mume是我国原产的名花佳果。为有效保护和利用野生种质资源，文中采用了AFLP标记技术，结合形态表型特征分析，对65份野梅种质进行试验分析。首先从64对引物中筛选出MseⅠ-EcoRⅠ8对引物组合，扩增出1 002条多态性条带。按照Nei’72距离系数进行聚类，在Nei’72=0.26处，可区分西山野梅原变种、西山野梅原种、西山毛梅、厚叶梅、南大坪桃梅、嵩明小梅、曲梗常绿梅、蜡叶梅以及匍匐梅，这与形态学上变种或变型的划分一致。群体内变种单株样本遗传多样性丰富。基于梅花种质资源的遗传变异，建

摘要:质粒DNA (pDNA) 作为重要的基因治疗药物载体，其广泛应用受纯度和产量的限制。为了获得高纯度的pDNA，首先制备超大孔连续床晶胶基质，接枝二乙氨基乙基葡聚糖得到阴离子交换型晶胶介质；然后以pUC19质粒为例，将目标质粒转化至大肠杆菌，培养收集，碱液裂解和离心；最后用阴离子交换型晶胶介质从离心上清液中一步法层析分离pDNA。通过优化层析过程的pH值和洗脱条件，最终在pH值为6.6时，用0.5 mol/L的NaCl溶液洗脱，得到较高纯度的pDNA。整个分离过程中不使用动物源性酶，也不需常规分离中的高毒试

摘要:为验证真核表达的携带绿色荧光的抗HER2单链抗体应用于临床诊断HER2阳性肿瘤细胞和病理组织的可靠性，构建融合基因Anti HER2 ScFv-GFP，重组入pFAST Bac HT A载体，在昆虫细胞Sf9中表达，以Ni2+-NTA亲和层析法纯化Anti HER2 ScFv-GFP融合蛋白，测定其浓度与纯度，将同浓度的纯化蛋白分别与3种乳腺癌细胞BT474、SKBR3和MCF7各混合12 h、24 h和48 h，分析其在不同时间段结合HER2阳性肿瘤细胞的稳定性。用纯化蛋白直接检测经抗原修复的乳腺癌病理