摘要:非常规酵母系指除了酿酒酵母与粟裂殖酵母之外的酵母曹。非常规酵母可利用其自主复制序列构建载体，但整合载体是进行外源基因导入的主要方式。非常规酵母的转化有一定的宿主范围，可采用与酿酒酵母相同的方法，最常用的仍为化学法。高效表达元件可利用酿酒酵母的强启动子，也可以根据非常规酵母菌的代谢特点寻找强启动子．本文综述了近年来应用非常规酵母基因表达系统表达外源基因的一些实例。

摘要:将含有硫霉素环化酶基因的重组质粒p6BCl2转化变铅青链霉菌(Streptomyceslividans)TK24，含有p6BCl2的转化子细胞抽提液分别与琉霉素生物合成阻断变株Y，发酵液以及纯化的Y。中间产物经过体外共培养可产生活性物质．化学分析表明与Y，发酵液混合后产生的是硫霉素，与纯化的Y。中间产物混合产生的是一种不稳定的活性物质。说明硫霉素环化酶基因在S.lividans TK24中得到了表达，其产物以Y。中间产物为底物并弥补了Y，中的缺陷。对p6Bcl2中4．5kb外源片段进行了限制酶酶切分析，建立了酶切图谱．利用含硫霉素环化酶基因的S．Lividans TK24转化子体外转化Y，的应用体系，将硫霉素环化酶基因定位在0．9kb Hinc I—Pst I片段上，并证明了硫霉紊环化酶的活性与IPNS同源片段无关。以上实验为进一步研究琉霉素环化酶基因的结构打下了基础。

摘要:将EcoRI部分消化的水稻(Oryza sativa L.)细胞核高分子量DNA电泳分部，回收大于200kb的片段，与内切酶消化过的酵母人工染色体(YAC)双质粒载体pJs97。pJS98DNA连接，转化酵母YPH252感受态原生质球，用ura^-,TrP^-双选择培养基直接筛选转化子，已获得2 000多个克隆。转化子DNA的southern杂交显示插入片段在200～820kb范围。

摘要:根据从水稻未成熟种子cDNA文库中筛选出的水稻巯基蛋白酶抑制剂(Oryzacys-tatin)cDNA序列，利用聚合酶链反应(PCR)技术扩增出Oryzacystatin编码区，插入到温度敏感型大肠杆菌表达载体的PtPL启动子下游．该质粒带有温度敏感型阻遏子的编码基因cIts857。转化大肠杆菌DH5a后。通过升温诱导，Oryzacystatin在大肠杆菌中获得高教表达，SDS—PAGE表明分子量约为12kDa。与预期结果一致，表达量占细菌可溶性蛋白总量的10％以上，对巯基蛋白酶的抑制活性检测表明，可溶性蛋白组分对木瓜蛋白酶有明显的抑制活力。

摘要:人干扰素α-2b的简易、高效生产工艺研究，包括高效率、小型化的发酵技术．不用单克隆抗体亲和层析的纯化工序．以及大肠杆菌表达的人干扰索α-2b包涵体蛋白的天然构型复性等问题．从10L基因工程大肠杆菌发酵液所得l000g菌体中得人干扰素α-2b约500mg，效价为l×10³u／mg，设备投资少，生产成本低，产品表现了高纯度、高效价。适宜大量生产，为广大人民群众提供廉价高质量药品创造了条件。

摘要:在特定融合组合的子代群体中，以不同姊妹菌株作为观察样本(n=N)，以蛋白质电泳全部谱带泳动率作为指标(p=P)。则所对应的谱带光密度扫描峰面积作为其观测值(x)(当某菌株缺乏某条带时，其峰面积记为零)，利用R-Q对应因子分析程序，解析这个数据矩阵(X_nxp)。能够在同一标度的因子平面上考察这一特定融合重组事件发生后．姊妹菌株间和各菌株内蛋白质谱带位置与含量间以及它们相互之间的多重内在联系，从而推断子代群体与亲本的遗传继承关系。并由此来识别和分群姊妹菌株。这种探索具有拓展数值分类能力和指导融合育种实践的意义．

摘要:采用诸葛菜子叶为材料。在MS+BA 3mg／l，+NAA O．2mg／L培养基上诱导芽的再生，1／2 MS+IBA 0．03mg／L．上诱导生根，获得完整再生植株，建立了诸葛莱组织培养高频再生系统，其再生率可达100％。采用土壤杆菌介导转化诸葛菜子叶．在附加一定量的氨苄青霉索、头孢霉素和卡那霉素的相应培养基上进行筛选，进而培养出再生成苗。获得完整植株，经GUS和NPTI酶活测定，以及Southern blot分析．证实为转基因植株。转化子叶的芽再生率为51％．获得完整转基因植株的转化率为5．53％。在国内外首次建立了以根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)为载体，诸葛菜子叶为受体的遗传操作系统。

摘要:使用基因脉冲导入仪成功地将糙皮侧耳DNA导入紫孢侧耳单核原生质体内，获得了具有"锁状联合”特征的双核转化菌株T₁，和T₂。转化率为8．2×10^-5，转化比为3．6％。酯酶同I酶分析结果表明，转化菌株除具有受体菌的酶带外，还存在供体菌的酶带，由此证明转化菌株确为紫孢侧耳和糙皮侧耳DNA重组的产物。转化菌株子实体形态也发生了变化。两菌株子实体均不释放孢子;T₁。菌柄中生，T₂成熟子实体菌盖中部易长出菌丝。

摘要:用基因枪、超声波和子房注射法转化玉米，所用质粒pB48．415带有3’端截短的Bt毒蛋白基因和潮霉素磷酸转移酶(hpt)基因。用基因枪轰击玉米胚性愈伤组织和幼胚，超声波处理玉米胚性愈伤组织，用自制的微玻针注射授粉后l0～20h的玉米子房，均已成功地获得了转Bt基因的玉米檀株．点杂交和Southern吸印杂交的结果都证明在转基因玉米檀株中存在Bt毒蛋白基因。

摘要:添加葡萄糖对昆虫细胞Sf21(Spodoptera frugiperda)悬浮生长的影响，发现补加糖量在lg／L时·能明显提高细胞生长的速度和最高密度，细胞最高密度由2．5×10⁴／ml增加到4.9×10⁶／ml; 朴加糖量在2g／L时，则有显著的抑制作用，即使增加接种密度．细胞生长的最高密度也只有2．1×10⁶／ml。当采取流加葡萄糖方法来培养细胞时，则其生长的最大密度可提高到5．2×10⁶／ml。

摘要:用rhEPo作为抗原，免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与x63Ag8．653小鼠骨髓瘤细胞融合，再碱性PAGE方法进一步分离并纯化的rhEpo，包被Pvc板，对杂交瘤用ELlSA方法进行筛选，获得两株稳定分泌抗hEPO单抗的杂交瘤细胞株。经鉴定分别属于IgG1、IgG2b,轻链均为k链，Kd分别为5．53×10^-10mol／L和1．34×1O^-10mol／L．用western blot方法证明两者对hEPO具有高度韵专一性．能特异地识别rhEPO和尿源hEPO。所制备单抗可作为亲和层析的配体，用于再生障碍性贫血病人尿中EPO及哺乳类工程细胞所表达的hEPO的分离、纯化，并可用于hEPO的定量检测．

摘要:用微量量热计测定了福氏志贺氏菌(Shipella flexneri)中7株菌(6、2b、3b、sb、la、x、y)在合成药物抑制作用下生长的热谱图，按限制性条件下微生物生长的模型进行了数学处理，得出了比生长速率(μ)，由此确定了各细菌比生长速率(μ)与药物浓度?之间的定量关系，求出了比生长速率(μ)为零时的用药浓度，并对该合成药对各细菌的抑菌效果进行了分析．

摘要:以耐盐的菠菜mRNA为横板．经反转录合成甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因第一链cDNA。在人工合成的两端引物引导下，通过多聚酶链式反应(PCR)。扩增获得双链cDNA。把重组有BADH基因的pucl9转化至E．Coli DH5a菌株，亚克隆后测定了基因的全序列。所得到的BADH基因全长序列为1491bp，编码497个氨基酸。与文献报道的相比较，核苷酸序列同源性99．8％．氨基酸序列同源性达99．6％。在此基础上，构建了BADH基因的高等植物表达载体．

摘要:利用细胞质导入(Cytoduction)法中的核融合缺陷细胞融合技术，在对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)D518菌株不做任何遗传标记，将嗜杀酵母5045菌株的嗜杀质粒转移到受体菌D518中，获得了具有两亲株优良性状的融合子KDl02菌株。对融合于分析表明：融合子遗传性状稳定，不仅含有供体菌5045的嗜杀质粒，而且受体菌D518的核基因被原封不动地保留下来，为异质体细胞(Heteroplasmon)。将融合子KDl02菌株用于小型、中型及生产性酿酒试验。结果表明．具有与亲株D518同样的酿造特性。在发酵过程中．能抑制野生酵母污染，净化发酵体系。对于保证啤酒纯种酿造及提高成品酒的生物稳定性具有明显效果。

摘要:将编码宋内氏痢疾菌(Shigella sonnei)l相O抗原的基因和霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的CT—B基因克隆至带asd基因的质粒PYA248．得重组质粒PMGLl05。将该重组质粒转入asd基因缺失的减毒伤寒沙门氏茵X4072．构成了一个不带抗药性基因的载体-宿主平衡致死景统。一系列实验表明．该重组苗X4072(PMGLl05)能稳定地表达宋内I相O抗原和霍乱弧菌的CT-B抗原．小鼠免疫保护实验表明，该重组菌对有毒的宋内氏I相痢疾杆菌及霍乱弧菌的攻击均具有良好保护作用。

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