摘要:选Tac启动子，构建了以牛凝乳酶原B前161个氨基酸的多肽基因与人胰岛素原基因的融合基因的表达质粒pJG202，转化大肠杆菌JMl05，表达受IPTG及温度诱导。高表达时，按电泳扫描计算，表达的融合蛋白可占细胞总蛋白的20－35％。经CNBr裂解，S－磺酸解，初步分离S－磺酸型的人胰岛素原后再使之重组，可分离得人胰岛素原纯品，其氨基酸组成、生物活性与人胰岛素原标准相同。

摘要:利用人、兔、鼠SRY序列设计引物，应用PCR扩增牛的SRY序列，获得200bp的雄牛特异的扩增片段。克隆该扩增片段，获得重组质粒pCH21，进行序列分析，并与人、兔和鼠SRY的对应区域比较，具有高度同源性。用pCH21 DNA作探针与牛的基因组DNA酶切图谱杂交，显示了雄牛特异的I．7kb的杂交带。分析200bp的PCR扩增片段是牛的SRY基因片段。用同一对引物扩增人和山羊的DNA样品，也获得雄性特异的200bp的扩增片段。

摘要:采用亲和层折的方法纯化了NODD蛋白——根瘤菌中结瘤基因D(nodD)的产物。用这纯化的NODD研究黄烷酮(Naringenin，以下简称NAR)、NODD和nod－启动子间的相互作用。当NAR浓度低于0．4mmol／L时，实验没显示NARR对NODD和nod启动子之间专一性结合的影响，然而当浓度达到4．0mmol／L时，NAR能明显解离NODD和nod－启动子间的结合，这表明NAR、NODD和nod－启动子之间的相互作用是存在的。

摘要:从黑曲霉糖化酶高产株T21分离总Poly(A)⁺RNA，经反转录合成cDNA，建立cDNA库。以糖化酶基因片段为探针从cDNA库进行筛选，阳性率达1．6％。由限制酶酶切图谱确定30％的阳性克隆携带全长的糖化酶cDNA。序列分析结果表明，菌株T21虽经多次诱变获得，但糖化酶基因编码区序列与文献报道的黑曲霉糖化酶基因编码区序列一致。从菌株T2l构建的cDNA库中含糖化酶cDNA插入片段的克隆的高比率充分证明，菌株T21中稳态糖化酶mRNA含量很高，显然这是突变株T21糖化酶高产的重要原因之一。

摘要:从pro—uK全长cDNA中切下包括信号肽序列的N端371bp片段，经Fnu4HI不完全酶切将信号肽序列去掉，回收304bp片段，该片段再与人工合成的含HindⅢ、EcoRV内切酶位点和起始密码ATG的寡核苷酸片段连接，转化得一重组质粒，该中间质粒经酶切和序列分析证明构建正确后再与pro—UK cDNA其余片段相连按，得到全长pro一UK cDNA。我们将所得不含信号肽序列的pro—UK cDNA重组到带有PRPL启动子的原核表达载体pHv220中，转化大肠杆菌JM101，42℃诱导6h，菌体超声破碎后其上清及不溶性成份均可测出尿激酶活性。用ELISA法检测尿激酶抗原性表现为强阳性；纤维蛋白溶解平板法(FAPA)测定活性可达500－1000IU／L，经复性活性可达60000lU／L，虽表达产物可被抗尿激酶血清特异中和，经相差显微镜及电镜观察均证明表达蛋白绝大部分以包涵体形式存在。Western blot分析证明表达产物为单链pro-UK，分子量约为47kDa，与国外文献报导一致。

摘要:宜昌橙(Citrus ichangensis SwingIe)试管实生苗叶肉原生质体与伏令夏甜橙(C．Sin-ensis Osbeck)胚性悬浮细胞系原生质体，经聚乙二醇(PEG)诱导融合。再生出的胚状体为畸形，转移到生芽培养基中诱导产生丛芽。丛芽微嫁接在15天龄的枳壳砧上成为完整植株。幼叶染色体检查表明，两亲本均为二倍体2n=2x=18，融合后再生出的植株为四倍体2n=4x=36。过氧化物酶(POX)及谷草酰胺转氨酶(GOT)同工酶分析证明，这些四倍体均为体细胞杂种，它们同时含有双亲的酶带。杂种植株叶片形态更像甜橙。植株移八土壤后生长旺盛。

摘要:本文针对间歇式土霉素发酵过程(FBOFFP)中生产期后期产物增加慢的较普遍问题，采用了两阶段最小二乘法和Durbin程序，建立培养因子，生化园子和产物因子的多对多同归模型，得出培养基残氮低是造成比生产率低的结论。但原有工艺却认为残氮是不低的，其原因在于以前的氮测最法不能把有用氮与无用氮区分开来，采用了新引进的测量法后，结果发现：无用氮不低，而有用氮却是显著的时间减函数，从而证实了本文的结论是完全正确的，3000h工业试验的结果表明：产量在原来较高基础上增加1％，发酵效价达到32000μ／ml。

摘要:本文简要介绍了华东化工学院研制的CellCuI-20细胞培养生物反应器，报道了此反应器用于细胞和病毒培养的情况。经严格的无菌试验和一年多的培养表明：CellCul－20反应器具有优良的抗污染性能，其主要参数的控制完全满足细胞培养的要求，并能根据培养过程的实际情况，随时对参数进行修正。用所开发的培养工艺进行Vero细胞和乙脑病毒培养，细胞在较短时间内达到高密度，乙脑病毒滴度和抗原效价均取得了较为满意的结果。在国际上第一次成功地应用Vero细胞大规模培养乙脑病毒原制苗。

摘要:固定于海藻酸钙、琼脂、卡拉胶、聚丙烯酰胺凝胶，魔芋葡苷露聚糖等几种载体上的己酸菌株(Doseridium sp．WI)批次发酵表明，海藻酸钙包埋己酸菌活性最高。在最适条件下，己酸产量最高可达15mg／ml，经18批次(200余天)的批式发酵，固定化己酸菌产己酸活性稳定性较好，4℃储存二月后的固定化细胞，其发酵产己酸活性与储前基本相同。短暂的与空气接触对固定化己酸菌的活性几乎没受影响。与游离已酸菌比较，固定化细胞的己酸生成速度加快，己酸产量明显提高，单位体积内的细胞数目可高出游离培养的近10倍。

摘要:以甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)内蒙分离物的RNA为模板，通过PcR扩增获得外壳蛋白(CP)基因的目的片段。将其重组到pGEM一7zf(+)并转化JMl01得到了含有完整CP基因的重组子。采用双脱氧终止法进行序列分析，结果表明CP基因为567nt，与文献(1]报道相比，氨基酸和核苷酸的同源性分别为98．4％和96．7％。

摘要:从即将成熟的豇豆予叶中分离出总RNA，逆转录合成cDNA第一条链。参照已知的几种Bowman—Birk型胰蛋白酶抑制剂基因序列，设计并合成了两段寡核苷酸引物，以单链cDNA为模板，进行PCR扩增，得到320bp的均一扩增产物，克隆到pBluescrip sK(+)的EcoRV位点上并转化大肠杆菌JM101。酶切图谱及DNA序列分析表明克隆到的片段含有编码完整80个aa的豇豆胰蛋白酶抑制剂结构基因和一段编码27aa的前导序列。利用限制酶NcoI对其前导序列进行缺失，只保留成熟蛋白结构基因上游第一个ATG密码子并克隆到大肠杆菌表达载体pKK233—2中进行表达研究，从转化细菌的提取物中检测到了外源CpTJ基因表达产物对胰蛋白酶的抑制活力。

摘要:本文报道了用海藻酸钙凝胶包埋法制备固定化谷氨酸捧杆菌T6—13原生质体及其用于生产谷氨酸脱氢酶(GDH，E．C．1．4．1．4)的研究。在一定条件下游离细胞和固定化细胞胞内可积累谷氨酸脱氢酶，但并不分泌到胞外。对数生长前期的细胞经蛋清溶菌酶处理14h后分离得到原生质体，游离原生质体和固定化原生质体可产胞外GDH。用3％海藻酸钙凝胶包埋10%的原生质体制备的固定化原生质体具有较高的产酶性，分批培养72h后发酵液中GDH活力可达到1．64×10^-2u／ml，为游离细胞胞内产酶的205％。固定化原生质体可用溶菌酶处理固定化细胞而制得，与直接固定化原生质体制备的固定化原生质体具有同样的产酶能力，且制备方便。固定化原生质体可重复使用6批次(约18天)，且具有良好的贮藏稳定性。

摘要:应用5L生物反应器悬浮培养乙肝重组DNA转化的CHO细胞B43株生产HBsAg。试验了细胞接种量、微载体的加入方式、培养方法(半流加培养和连续灌流名养)对细胞生长形态和HBsAg分泌的影响，初步建立了5L生物反应器的生产工艺，在5L生物反应器最适合连续灌流培养的条件是pH 7．30—7．40，Do 25～3；％，T 36．5℃，微载体6～8g／L，灌流速度5．5—7．5L，24h细胞连续培养60天，细胞密度维持在5．O×10　6～1．O×10　7／ml之间，收获细胞液的RPHA效价为l：512—1：1024．HlBsAg含量为3－5mg／I。

摘要:应用水稻花药培养技术，通过对抗s－氨乙基半胱氨酸(AEC)突变体的选择，研究了细胞水平筛选高含量赖氨酸水稻种质的效果。结果表明，AEC可抑制水稻花药(粉)愈伤组织的形成与生长，用O．5mmol，L AEC进行诱导或继代筛选，可获得抗性愈伤组织并再生绿苗，但仅有少数个体自然加倍正常结实，并保持对AEC的抗性。经多代选择与鉴定，获得了丰产优质突变体A一87306，其糙米游离赖氨酸含量0．43％，较对照增加34．38％。初步认为以AEC为外源胁迫因子，离体筛选水稻高赖氨酸含量的细胞突变体是有效可行的。

摘要:对50L内循环气升式发酵罐的混合、传质、气含率、液体循环等性能进行了系统的研究，优选出设备的最佳结构及得出氧的体积传质系数(k_La)关联式。在此基础上，进行了谷氨酸的一次低糖发酵试验，得出适用于此设备的谷氨酸发酵最佳工艺。实验结果的最高产酸率为7．69％，转化率为58．8％，比使用同一菌种的用机械搅拌罐发酵的产酸率(6．O％)及转化率(44％)分别提高28．2％和33．6％。

摘要:IABS模型是本研究中确立的理性化菌种选育方法，可用于高效率地筛选多种调控变株。大大减少摇瓶筛选工作量。利用IABS模型以L－异亮氨酸产生菌Brevibacterium flavumAslll为出发菌株，有目的地活化PC、HD和AHAS等酶，筛得变株23—10(α—AB rrt+Suc g+Eth rr)，23—10在优化的培养条件下可产生20mg／ml以上的L-异亮氨酸，且无L-亮氨酸积累。23—10变株25代后，产酸能力毫不下降。

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