1987, 3(3).
摘要:本文报道用Hind I+BamHI双酶切方法,从大肠杆菌K12的野生型菌株染色体上克隆苏氮酸操纵子的三个基因(thr A,thr B和thr C)到载体pBR322上,在合成培养基上筛选带thr操纵子的转化子。所得杂种质粒pTH1经羟胺体外诱变,筛选得到抗氨基酸类似物a-氧基-β-羟基戊酸(AHV)的突变质粒pTH2和pTH3,在宿主大肠杆菌C600中产苏氨酸最比初级克隆株高20倍以上,在解除天冬氨酸激酶—高丝氨酸脱氢酶(AKI—HDI)反馈抑制的宿主大肠杆菌A56—121中产苏氨酸量可达11g/L,比初级克隆株大肠杆菌 c600(pTHl)高100倍以上。
郑兆鑫 马楚平 严维耀 贺沛富 毛宜祥 孙薇 雷肇祖 朱平 吴菊芬
1987, 3(3).
摘要:从谷氨酸棒状杆菌中已经分离到质粒pxzl0145,该质粒带有氯霉素抗性。通过电子显微镜和BamH I酵切后在1%琼脂糖凝胶电泳上测定pXZl0145质粒的大小为5.3kb。用Bam—HI、PstI、EcoRI、saII等限制酶进行酶切,并用BamH I+sa1 I、BamH I+Pst I、Pst I+sal I、EcoR I+Pst I、EcOR I+BamH I等双重酶切,得到pxzlol45限制性内切酶的图谱。证明BamH I和Pst I为单一酶切点。将pxzl0 145与pBR322利用BamH I切点连接得到一嵌台质粒pxz34。这一质粒能在大肠杆菌中复制,在大肠杆菌中表现有氨苄青霉素和氯霉素的抗性,但是抗氯霉素的能力大大降低,只抗2Y/ml。
1987, 3(3).
摘要:本文报道了将欧洲流行的口蹄疫病毒O1-K亚型的主要表面抗原VP,克隆插入痘苗病毒的TK基因中,并在动物细胞中表达。所用痘苗病毒载体为我国长期用于防治天花的痘苗病毒效果安全的天坛株,所用O1K亚型VPl克隆为Hofschneider,P.H.教授惠赠的pFMDV-1034。首先将pFMDv一1034中的VP1基因片段插入中间质粒pBCB06的BamHI/Hind I位点,该质粒含痘苗病毒WR株的P7.5;启动子和多克隆位点,其两侧序列为TK基因(由D.Boyle博士赠)。或插八pBcB08的Hind I位点,该质粒与pBcB06。之区别仅在于启动子为PL11、多克隆位点种类不同。将杂合的中间质粒转化已由天坛株痘苗病毒TK+侵染过的143BTK-细胞,通过体内同源重组而获得有VP,基因插八的重组痘苗病毒。在BUDR存在时不能侵染143BTK-细胞的病毒可视为TK-表型病毒即含VP1基因的痘苗重组病毒,再经pFMDV—1034BamHI-Hind I片段为探针进行杂交确证。其中所得两株重组痘苗病毒V.V10344H、V.V103408在143B TK-细胞中繁殖并用ELIsA方法测表达,其P/N值最高分别为9.50和8.21。
1987, 3(3).
摘要:用pBR322作为克隆载体,从嗜热指肪芽孢杆菌658染色体上克隆了两个a-淀粉酶同功酶基因,这两个基因分别位于5.4kb和9kb的两个HiND酶切片段上。带有这两个基因的两个大肠杆菌克隆株所产生的a-淀粉酶活力在不同程度上比原来的嗜热脂肪芽孢杆菌658菌株的活力高,除了它们的酶反应的最适pH值相同外,它们的酶活力、耐热性、分泌性、酶反应的最适温度均不相同。
1987, 3(3).
摘要:用杂交瘤技术获得了7种抗人脲激酶单克隆抗体。这些抗体仅与脲激酶反应,而不与结构上类似于脲激酶的胰酶、胰凝乳蛋白酶反应,与正常人血清也无明显反应。免疫电转印实验及酶活力抑制实验表明,除N30识别脲激酶分子及18kd轻链外,其他6种抗体均识别脲激酶54kd分子及33kd重链,所有7种抗体均不抑制酶活力。本文也探讨了这组抗体用于脲激酶结构功能研究,纯化脲激酶以及对某些肿瘤诊断的可能性。
1987, 3(3).
摘要:本文研究了几种酶稳定剂和还原剂对固定化葡萄糖稳定性的影响。血红蛋白能提高固定化葡萄糖氧化酶的活力,在投入酶蛋白量和血红蛋白量之比为1:10时效果最明显。此外,在底物反应液中,加入还原性物质亦能提高固定化葡萄糖氧化酶的使用稳定性,其中维生素c效果最显著。
1987, 3(3).
摘要:当Pseudomonas sp.生长在植物油或正烷烃中时能产生大量的聚羟基丁酯(简称PHB)。其合适的培养基为2%正烷烃、O.05%尿素和0.05%酵母膏。从对数生长期至稳定期该菌累积的PHB量可达干细胞重的30-40%。该菌中获得的PHB的红外光谱图的吸收峰与其他细菌中获得的PHB相同。
1987, 3(3).
摘要:管道厌氧消化器是一种由若干管节横向串联组装而成的新型厌氧消化工艺。本文在分析管道厌氧消化器的流动状态和基质降解动力学的基础上,建立了管道厌氧消化器反应过程模型——离散模型。用实验值作了模型参数估值。模型模拟管道厌氧消化器过程结果表明,模型计算值与实验值拟合良好,误差为7%左右,模型用作预测,其结果是可信的。
1987, 3(3).
摘要:应用各种不同的染料配基层析介质,分离提纯了D-氨基酸氧化酶、碱性磷酸单酯酶、己糖激酶及Y-球蛋白。从D-氨基酸氧化酶中除去了几乎全部的酯酶,收率可达80%,碱性磷酸单酯酶的纯度增加了10倍;己糖激酶的纯度增加了4倍,收率可达70%;内丫-球蛋白中分离除去全部的蛋白水解酶。
1987, 3(3).
摘要:
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