青霉素G酰化酶操纵子的负调控因子的研究

摘要:

青霉素G酰化酶(PA)操纵子的调节基因(pacR)存在于青霉素G酰化酶结构基因(pac)内部Dral-Taql一段约500bp的DNA片段内，此片段内含有2个ORF。2个ORF及其突变体分别克隆到pUC18得到一系列重组质粒，用这些重组质粒转化青霉素G酰化酶产生菌E.coliD816，测定克隆片段对PA表达的影响。如果克隆片段含有具功能的pacR，诱导剂苯乙酸(PAA)不能使由高拷贝却pacR表达的阻抑物全部失活，部分阻抑物结合pac操纵基因，阻碍RNA聚合酶对pac的转录，因此PA的表达量降低。结果表明，阻抑物是由pac结构基因内部的ORF2编码的蛋白因子，pacR即ORF2。RNA—DNA杂交实验证实了pacR在转录水平阻抑pac的表达。

Abstract: