建了α-天冬氨酰二肽酶基因(pepE)与载体pBV220连接的高表达重组质粒(pBVPEP,4337bp)。转化大肠杆菌后,目的基因表达为两种形式的产物,即细胞质中可溶性蛋白(~75%)和包含体蛋白,共占细菌总蛋白的30%左右。SDS-PAGE分析温敏诱导的表达蛋白,可以观察到约27kDa的高表达蛋白条带,与提纯的酶带一致。用不同于以往的萃取包含体蛋白的方法,回收了包含体中95%以上的表达蛋白。
张红缨 杨巍 王晓萍 张今. α-天冬氨酰二肽酶基因的高表达和产物回收[J]. 生物工程学报, 1998, 14(2):
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