人红细胞生成素单克隆抗体的制备、鉴定及应用研究

摘要:

用rhEPo作为抗原，免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与x63Ag8．653小鼠骨髓瘤细胞融合，再碱性PAGE方法进一步分离并纯化的rhEpo，包被Pvc板，对杂交瘤用ELlSA方法进行筛选，获得两株稳定分泌抗hEPO单抗的杂交瘤细胞株。经鉴定分别属于IgG1、IgG2b,轻链均为k链，Kd分别为5．53×10^-10mol／L和1．34×1O^-10mol／L．用western blot方法证明两者对hEPO具有高度韵专一性．能特异地识别rhEPO和尿源hEPO。所制备单抗可作为亲和层析的配体，用于再生障碍性贫血病人尿中EPO及哺乳类工程细胞所表达的hEPO的分离、纯化，并可用于hEPO的定量检测．

Abstract: