人α降钙素基因相关肽基因在酵母细胞中的分泌表达与产物的分离纯化

摘要:

化学合成的人α降钙素基因相关肽(CCRP)基因用PCR法改造后使其能正确融合在酵母分泌型表达载体pVT102U/α中的α交配因子前导肽序列之后，然后进行克隆并转化酵母宿主菌S－78进行表达．培养物的上清用酶标(ELlSA)鉴定为阳性，而对照S－78、pVT102u／α为阴性，表达量用ELISA定量大于2mg／L。表达产物经阳离子交按层析(CM—Sphadex C₂₅)和HPLC纯化得到了HPLC纯产品。纯化后的CGRP能引起小鼠血压的降低，说明表达的目的蛋白既有CGRP的免疫结合活性，又有CGRP的生理活性。测定其N－端10个氨基酸序列，证明人工合成的CGRP基因在酵母细胞中已正确表达。

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