半衰期延长获得PAI－1抗性的t—PA突变体的构建、表达及特性分析

摘要:

用基因重组及定位突变技术成功地构建了t·PA的Kl区缺失突变体t—PAdelKl、PAI-1结合位点缺失突变体t—PA del(296—302)及两者的组合突变体t—PA del(Kl·296—302)，并在COS－7细胞中实现三者的暂时性表达，在cHO细胞中实现了t·PA deI(K1．296—302)的稳定性表达．对表达产物的生物学特性分析表明，t—PA del(296—302)及t-PA del(K1，296—302)获得了Pal－1抗性．因时t-PA del(K1．296—302)在大鼠体内的半衰期延长约5倍，而与纤维蛋白的亲和力只略有下降。因此，此组合突变体有可能成为优于野生t—PA的新型溶栓剂候选株．

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