电击法诱导的欧白英原生质体转化和转化植株再生

摘要:

本研究使用电击法成功地将带有标记基因NPTⅡ的质粒pCaMVNEO转入欧白英的原生质体，并获得了再生转化植株。通过用pDW2质粒进行的CAT基因短暂表达研究，确定了欧白英原生质体转化的电击条件为：电容30nF、电场强度l 500V／cm、时间衰变常数59．4微秒；质粒DNA浓度为20μg／2×10⁶原生质体。在以上条件下，欧白英原生质体的相对转化率为12．4％，绝对转化率为2.4×10^-4在大多数抗性愈伤组织和从抗性愈伤组织再生的植株中检测到新霉素磷酸转移酶活性。分子杂交结果也证明了在转化植株中存在NPTⅡ基因序列，而未转化的对照植株则没有。

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