禽流感病毒H5HA、H7HA、H9HA亚型血凝素基因在毕赤酵母中的表达

摘要:

利用毕赤酵母表达系统进行了禽流感病毒H5HA、H7HA及H9HA亚型血凝素基因的真核表达研究。首先将H5HA、H7HA及H9HA基因片段分别插入酵母分泌型表达载体pPIC9K中，获得重组质粒pPIC9K_H5HA、pPIC9K_H7HA和pPIC9K_H9HA；再将所获重组质粒分别经SacⅠ、BglⅡ及SalⅠ线性化后，电转化GS115感受态细胞，以插入/替换的方式进行重组，并经MD平板与MM平板筛选，及PCR鉴定，得到重组酵母工程菌GS115/pPIC9K_H5HA、GS115/pPIC9K_H7HA及GS115/pPIC9K_H9HA；用甲醇诱导分泌表达目标蛋白。经SDS_PAGE和Western_blotting检测，结果表明，H5HA、H7HA及H9HA蛋白在毕赤酵母中均获得表达。酵母表达了上述目的蛋白，可直接进行抗原检测，并可用于抗体检测试剂盒及亚单位疫苗制备的辅助研究。

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