毕赤酵母表达的HBV全长Pres蛋白的分离纯化

摘要:

巴斯德-毕赤酵母工程菌株GS115-PreS经发酵在甲醇诱导下可高效表达分泌型全长PreS蛋白。Western blot证明发酵液中存在着可溶性的分子量为48kD的PreS蛋白和蛋白质颗粒，蛋白质颗粒主要成分为48kD的全长Pres蛋白和28kD的S蛋白，电镜观察发现蛋白质颗粒直径为30nm。发酵液经过脱盐、浓缩处理后，上清液经DEAESFF阴离子交换柱得到纯化的PreS蛋白；超速离心和蔗糖密度梯度离心得到蛋白颗粒。该颗粒的主要组分为全长PreS蛋白（PreS1＋PreS2＋S），还有少量的主蛋白（S）。ELISA检测证明全长PreS蛋白和蛋白颗粒有着良好的抗原性， P/N显示蛋白颗粒的抗原性比PreS蛋白的抗原性高。

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