小鼠3T3-L1前脂肪细胞系的增强绿色荧光蛋白标记

摘要:

细胞模型是研究细胞分化原理以及进行高通量筛选的有效工具。为了建立特异性标记的脂肪细胞分化模型，构建了包括脂肪细胞分化特异性表达基因PPARγ2的启动子在内的载体（pPPARγ2-promoter-EGFP），用电穿孔方法转染小鼠3T3L1 前脂肪细胞，用显微荧光观察和RT-PCR确认PPARγ2基因的内源表达。结果显示，EGFP基因成功转入3T3-L1前脂肪细胞，观察到细胞分化过程中EGFP表达和脂肪积累，RTPCR分析表明EGFP代表了稳定而真实的PPARγ2基因的内源性表达。建立了由脂肪组织特异表达基因PPARγ2的表达控制的EGFP标记的小鼠3T3-L1前脂肪细胞系，目前国内外尚未见用同样方法对前脂肪细胞进行特异性标记。该细胞系将为脂肪细胞分化机理研究以及为抗肥胖症和抗糖尿病药物筛选提供有力工具。

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