人端粒结合蛋白TRF1的克隆、表达和抗体制备
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    利用RT-PCR技术,从HeLa细胞的cDNA文库中扩增到人端粒结合蛋白1(hTRF1)基因编码区序列,克隆至pUCm-T载体,测序正确后,构建带His6-tag原核表达载体pET-28c-TRF1,经IPTG诱导表达的His6-TRF1融合蛋白分子量约为65kD,Western-blot证实表达产物可特异地与TRF1抗体sc-6165结合。用Ni2+NTA胶亲和层析纯化可得到电泳均一的融合蛋白,免疫新西兰纯种大白兔,获得特异性好的多克隆抗体,该抗体可用于免疫荧光染色和Western-blot方法检测哺乳动物细胞内源性的TRF1分子。

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引用本文

江红 郑晓飞 罗瑛 朱捷 付汉江 孙强玲 陈长浩 孙志贤. 人端粒结合蛋白TRF1的克隆、表达和抗体制备[J]. 生物工程学报, 2004, 20(1):

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