高山被孢霉ATCC16266Δ6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达

摘要:

Δ⁶-脂肪酸脱氢酶是形成γ-亚麻酸的关键酶。从含有高山被孢霉Δ⁶-脂肪酸脱氢酶基因的重组质粒pTMACL6中，酶切出14kb的目的片段，亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体pYES2.0，在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒pYMAD6，用醋酸锂方法转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INCSc1中，在SC-Ura合成培养基中，选择得到酿酒酵母工程株YMAD6。在合适的培养基及培养条件下，加入外源底物亚油酸，经半乳糖诱导后，收集菌体。通过GC-MS对酵母工程株进行脂肪酸色谱分析，结果表明，产生了31.6%的γ-亚麻酸。这是迄今为止，国内外Δ⁶-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中表达量最高的报道。

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