应用PCR方法，扩增人纤溶酶原cDNA基因中K4K5 cDNA片段，与酵母表达载体pPIC9K重组，获得表达质粒p9kkk18。该质粒转化毕赤酵母菌GS115，用G418YPD筛选高拷贝表型，PCR筛选K4K5 cDNA与酵母染色体整合形成的阳性克隆，阳性克隆用甲醇诱导表达。表达产物rK4K5分子量约215kD，占分泌总蛋白80%以上，产物浓度为150～250mg/L。初步纯化产物抑制牛毛细血管内皮(BCE)细胞增殖与鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管生成。
官孝群 王跃祥 吴良成 宋后燕. 血管生成抑制因子K4K5 Cdna基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J]. 生物工程学报, 2001, 17(2):
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