日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫cDNA文库的构建

摘要:

用TRIZOL试剂盒分别提取日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫总RNA，Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA，反转录合成第一链cDNA，完成第二链cDNA合成后，凝胶电泳回收500bp以上的片段并过柱纯化后，与载体λZipLox连接。体外包装后分别得到雌、雄成虫cDNA噬菌体表达文库。经测定雌、雄文库容量分别为3.74×10⁶、3.28×10⁶，重组比率均在96%以上，插入片段长度多在1kb左右。通过PCR技术，我们从文库中钓取到EGP、23kD膜蛋白、Actin和GCP的cDNA，其中GCP基因为低丰度表达基因。各项指标表明，我们成功构建了高质量的cDNA文库，可作为研究雌雄成虫基因差异及筛选保护性抗原基因的重要资源。

Abstract: