以免疫球蛋白为载体的抗O型口蹄疫病毒基因工程疫苗的构建

摘要:

以自体免疫球蛋白作为外源抗原的载体来研制疫苗是一条研制安全、高效疫苗的新途径。将猪IgG H链基因中的CDR3区缺失，剩余的两个片段分别连接到pBluescript Ⅱ SK(+)和pBluescript Ⅱ KS(+)上，其中一片段再与编码FMDV VP1两个拷贝的141～160位氨基酸残基和一个拷贝的200～213位氨基酸残基构成的串联片段20AA～14AA～20AA的核苷酸片段相连。然后将它们切下与质粒表达载体pET28b相连，构建出融合表达质粒p^ET_28b-FH，经限制酶酶解及DNA序列分析证明该融合基因各连接点及读框正确。转入大肠杆菌BL21(DE3)plysS表达出一分子量为64kD的蛋白质。经ELISA检验证明，大肠杆菌细胞中表达的融合蛋白有O型FMDV抗原活性。将该融合蛋白肌肉注射免疫豚鼠和猪，攻毒实验表明，疫苗p^ET_28b-FH对豚鼠产生了保护作用，保护率为66%，对猪也有保护作用。

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