摘要:【背景】豆血红蛋白可赋予素肉制品类似牛肉的红褐色质地，已被美国食品药物监督管理局批准作为人造素肉的着色剂，近年来受到广泛关注。【目的】优化毕赤酵母产豆血红蛋白的培养条件，提高毕赤酵母产豆血红蛋白的产量。【方法】首先通过单因素试验研究蛋白胨种类、大豆蛋白胨浓度、铁盐种类及血红素浓度在诱导阶段对毕赤酵母产豆血红蛋白的影响；然后通过Plackett-Burman试验设计筛选出对豆血红蛋白产量影响最大的3个因素，再通过最陡爬坡法确定3个因素的变化范围，对3个因素进行响应面分析；最后根据响应面结果进行摇瓶发酵和发酵罐高密度发酵。【结果】单因素试验发现：用4%大豆蛋白胨作为主要氮源、甲醇诱导浓度为1.5%、血红素浓度为5 μmol/L时发酵效果较好，经过响应面优化后得到蛋白胨浓度为51.48 g/L、pH 5.66、培养基装液量35.84 mL/250 mL是最优发酵条件。在此优化条件下，LegH摇瓶发酵产量为0.191 mg/mL，与预测值(0.183 mg/mL)比较接近。采用5 L发酵罐进行高密度发酵，LegH产量最高达到0.384 mg/mL。【结论】优化了毕赤酵母表达豆血红蛋白的发酵条件，获得了较高产量，通过罐上发酵的进一步优化，具有一定的工业化前景。

摘要:巴斯德毕赤酵母是一种重要的蛋白表达系统，基因编辑技术作为代谢工程的基本工具，对于毕赤酵母的代谢改造十分重要。近十年基因编辑技术发展迅速，除传统的同源重组和Cre/loxP重组外，相继出现了许多新的基因编辑技术，例如ZFN、TALEN和CRISPR/Cas9等，这些技术的出现使基因编辑更加简便高效。本文对毕赤酵母中传统和新型基因编辑技术的原理应用和研究进展进行了简要综述，并结合相关领域的发展对毕赤酵母基因编辑技术的发展进行了展望。