摘要:【目的】研究弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii) 1,3-丙二醇合成的代谢过程。【方法】构建甘油脱氢酶基因GSR-lacZ、1,3-丙二醇氧化还原酶基因PDO-lacZ和甘油脱水酶基因GL-lacZ等报告基因。在此基础上，构建3个相应的转座子突变文库。【结果】筛选到6株突变子，其相应关键酶表达水平提高1?11倍，1,3-丙二醇产量提高幅度为3%?50%。对转座子插入位点分析显示，5株突变子插入位点均为β-内酰胺酶(CKO_02592)编码基因，1株突变子插入位点为二氢硫辛酰胺基转移酶(CKO_02433)编码基因。进一步分析发现，β-内酰胺酶基因突变显著提高甘油脱水酶和甘油脱氢酶的表达水平，而1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平没有变化；二氢硫辛酰胺基转移酶基因突变显著提高1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平，其他两种关键酶基因表达水平不变。【结论】β-内酰胺酶和二氢硫辛酰胺基转移酶基因能够分别影响1,3-丙二醇合成代谢途径关键酶的表达，为构建工程菌株打下基础。