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摘要:【目的】炭样小单孢菌JXNU-1是一株具有广谱抗菌活性的放线菌，研究揭示该菌的基因组序列信息。【方法】采用高通量测序技术对炭样小单孢菌JXNU-1的基因组DNA测序，利用SOAPdenovo软件组装，人工PCR修补基因组部分缺口，然后进行生物信息学分析。【结果】对炭样小单孢菌JXNU-1的全基因组序列进行了测定和注释，得到基因组精细图，相关序列已提交GenBank，获得登录号为JXSX00000000。【结论】研究为揭示炭样小单孢菌JXNU-1抗生素产生机制及其抗菌机理提供了基础数据，对进一步研发其抗生素具有重要的理论意义和巨大的应用价值。

摘要:【目的】分析倭蜂猴粪便微生物中苯酚羟化酶(Phenol hydroxylase，PH)和邻苯二酚1,2-双加氧酶(Catechol 1,2-dioxygenase，C12O)的基因多样性。【方法】利用简并引物，以倭蜂猴粪便微生物宏基因组DNA为模板，通过PCR扩增，分别构建PH和C12O基因克隆文库，并对克隆进行测序分析。【结果】倭蜂猴粪便微生物来源的PH和C12O基因序列经BLAST比对分析，与GenBank中相应酶的序列一致性分别介于92%?100%和87%?100%。系统进化树分析表明PH基因序列与Neisseria、Burkholderia、Alcaligenes、Acinetobacter 4个属来源的PH序列相关；C12O基因序列全部与Acinetobacter来源的C12O序列相关。序列比对结果表明PH序列具有LmPH (Largest subunit of multicomponent PH)中高保守的两个DEXRH结构域；C12O序列具有能被Ag+和Hg2+抑制的位点(半胱氨酸)。【结论】倭蜂猴粪便微生物来源的PH为多组分PH，其降解苯酚的中间产物邻苯二酚可以被C12O通过邻位开环途径裂解。

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摘要:【目的】L-丙氨酸的存在导致Escherichia coli的生长速率显著降低，最终会降低发酵过程中L-丙氨酸的体积合成速率。用温度调节基因开关(λpR-pL)高效、动态调控重组E. coli菌株菌体生长与L-丙氨酸合成过程，使两者相协调。【方法】以野生型E. coli B0016为出发菌株，敲除乙酸、甲酸、乙醇、琥珀酸、乳酸代谢产物合成途径以及丙氨酸消旋酶编码基因(ackA-pta、pflB、adhE、frdA、ldhA、dadX)，获得菌株B0016-060B。将嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)来源的L-丙氨酸脱氢酶基因(alaD)克隆于pL启动子下游，并在B0016-060B菌株中表达，获得菌株B0016-060B/pPL-alaD，进行摇瓶和发酵罐发酵考察菌体生长和L-丙氨酸发酵性能。【结果】竞争代谢途径的敲除显著降低了副产物合成量，仅形成极少量的乙酸、琥珀酸和乙醇。28 °C下菌株B0016-060B/pPL-alaD几乎不合成L-丙氨酸，可保证菌体快速生长；而在42 °C下可高效合成L-丙氨酸。经发酵罐发酵，可合成67.2 g/L L-丙氨酸，体积生产强度达到2.06 g/(L·h)。【结论】通过发酵培养温度的简单切换，分阶段实现了细胞的快速增量和L-丙氨酸的高强度合成。

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摘要:【目的】筛选与酵母乙酸耐受性状紧密相关的微卫星分子标记。【方法】以两株表型差异菌株YHA和YLA作为亲本构建F2代菌株共计160株，选取15个微卫星位点通过PCR方法在40株子代中扩增产物，利用SPSS 11.5软件分析耐酸性状与微卫星序列间的相关性。【结果】找到3个与乙酸耐受性性状相关的微卫星位点，其中位点14P2与酵母乙酸耐受性状有极显著的正相关性(P<0.01)，15P2和15P3与酵母乙酸耐受性具有显著的负相关性(P<0.01和P<0.05)；此外对于微卫星位点14P2，耐酸亲本YHA在该位点的基因片段(344 bp)在子代耐酸菌株中出现频率达到70.6%，而不耐酸亲本YLA的基因片段(331 bp)在子代不耐酸菌株中出现的频率达91.3%。【结论】微卫星14P2的等位基因在子代菌株中的遗传具有明显的偏好性，该微卫星位点与某种耐酸基因存在一定的连锁遗传，为酵母分子标记辅助育种提供了有价值的遗传标记。

摘要:【目的】分离纯化米曲霉蛋白酶的主要组分，分析其酶学特性，并应用于酪蛋白磷酸肽(Casein phosphopeptides，CPPs)的制备。【方法】采用硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析和Butyl-sepharose HP疏水层析对米曲霉蛋白酶进行分离纯化，SDS-PAGE检测分子量与纯度，MALDI-TOF-MS检测酶切位点。【结果】得到一种蛋白酶组分(命名为PE)，分子量大小为58 kD左右。该酶最适反应条件为55 °C，pH 8.0，酶活被Fe3+抑制，被Mn2+激活。以酪蛋白为底物时，Km=0.36 g/L，最大反应速率Vm=18.18 mg/(L?min)。蛋白酶PE对牛胰岛素B链上-Leu-Cys-、-Val-Glu-、-Tyr-Leu-和-Arg-Gly-组成的肽键有较高的切割能力，酶切位点较多。利用其水解酪蛋白，通过钡-乙醇沉淀法得到CPPs，产率为15.87%，摩尔氮磷比r (N/P)为6.17，得到的CPPs可以使钙沉淀推迟35 min。【结论】利用米曲霉蛋白酶水解酪蛋白产生CPPs，为其在功能性食品加工方面的应用提供有利的参考。

摘要:【目的】提高克雷伯氏菌胞内还原力以强化1,3-丙二醇合成。【方法】将来源于大肠杆菌的木糖异构酶基因在克雷伯氏菌中异源表达，构建重组菌。研究重组菌添加不同浓度木糖为辅底物与甘油共发酵过程中代谢产物和NADH的变化规律。【结果】与对照菌相比，重组菌细胞内还原力NADH提高了0.1?0.3倍，1,3-丙二醇产量达到23.31 g/L，提高20%，1,3-丙二醇转化率从0.60 mol/mol提高到0.73 mol/mol。【结论】木糖异构酶基因的表达强化了木糖代谢途径，经磷酸戊糖途径积累大量还原力，促进了1,3-丙二醇的生成。

摘要:【目的】研究从酱香型白酒发酵酒醅中分离得到的2株主要乳酸菌Lactobacillus homohiochii XJ-L1和Lactobacillus buchneri XJ-L2对酱香型白酒发酵中酿造微生物群体的作用，并探索该种相互作用对酱香型白酒品质的影响。【方法】结合抑菌实验和组合发酵实验研究L. homohiochii XJ-L1和L. buchneri XJ-L2对酿造微生物群体生长的影响，通过对纯培养和共培养体系中代谢物的比较，研究2株优势乳酸菌对主要酿造酵母风味相关代谢产物的影响。【结果】L. buchneri XJ-L2能够抑制3株芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens XJ-B1，Bacillus subtilis XJ-B2，Bacillus licheniformis XJ-B3)、5株霉菌(Aspergillus oryzae XJ-M1，Aspergillus niger XJ-M2，Aspergillus flavus XJ-M3，Aspergillus albicans XJ-M4，Rhizopus oryzae XJ-M5)、2株酵母(Schizosaccharomyces pombe XJ-Y4，Geotrichum candidum XJ-Y5)的生长；L. homohiochii XJ-L1和L. buchneri XJ-L2能够促进3株主要酵母(Saccharomyces cerevisiae XJ-Y1，Zygosaccharomyces bailii XJ-Y2，Pichia galeiformis XJ-Y3)的生长，同时促进其酸类、醇类、酯类等风味物质的代谢。【结论】L. homohiochii XJ-L1和L. buchneri XJ-L2可促进3株主要酵母的生长代谢，同时L. buchneri XJ-L2明显抑制细菌、霉菌和少数酵母的生长，以此促进和维持主要酵母在酱香型白酒发酵过程中的生态地位，从而影响酒中酸类、醇类、酯类等风味物质的形成，保证酱香型白酒的品质。因此，适当比例的乳酸菌对维持酿造微生物区系平衡，生产典型酱香品质白酒具有重要意义。

摘要:【目的】酿酒酵母是白酒发酵的主要微生物，对白酒的产量及质量都有重要影响。而酱香酒酿造环境具有高温、酸性、高乙醇等胁迫因素，研究其中酿酒酵母的生理代谢特征并有目的地应用于白酒实际生产中。【方法】从酱香酒酿造环境中筛选一株性能优良的酿酒酵母菌株，比较其与酿酒酵母模式菌株S288c和商业酵母的生理代谢特征。【结果】从酱香型酒醅中筛选得到性能优良的Saccharomyces cerevisiae MT1，该菌株可耐受高温42 °C，高浓度乙醇(16%，体积比)，低pH (2.0)，其最大比生长速率和最大比产乙醇速率分别达到了S288c的125%和114%，其乙醇转化率也要高于其他菌株。一些挥发性物质只有在MT1的发酵液中可检测到，包括苯并噻唑、2,3-二氢苯并呋喃、4-乙烯基愈创木酚以及丁羟甲苯等，MT1的苯乙醇、法呢醇、橙花叔醇、乙偶姻和大马酮量也要高于S288c。另外，MT1可以利用多种碳源发酵产乙醇，如半乳糖、麦芽糖、蜜二糖、松二糖、海藻糖和棉子糖等。【结论】来源于酱香酒酿造的S. cerevisiae MT1具有高耐受力、高效的发酵性能及更广泛的碳源利用图谱，并能生成多种挥发性物质。

摘要:【目的】研究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工业菌株Mbp1基因的功能，探讨Mbp1基因对酿酒酵母乙醇发酵性能的影响。【方法】以酿酒酵母MF1015为出发菌株，用PCR方法构建Mbp1基因敲除组件Loxp-KanMX-Loxp，将敲除组件转化两种配型的酿酒酵母单倍体，通过单倍体复倍获得敲除Mbp1基因的二倍体突变菌株，研究突变菌株形态变化及乙醇发酵特性。【结果】敲除Mbp1基因后突变菌株生长曲线无显著变化，出芽率降低，细胞体积增大19.2%，对饥饿更敏感，较早出现假菌丝。甘蔗糖蜜在静置条件下发酵，突变菌株的乙醇产量明显低于野生型；在130 r/min的条件下发酵，突变菌株和野生型发酵液中的乙醇产量基本相同。【结论】Mbp1基因缺失使酿酒酵母的乙醇发酵能力下降并影响细胞的形态分化。

摘要:【目的】了解水葫芦根际细菌群落结构。【方法】运用末端限制性片段长度多态性(Terminal restriction fragment length polymorphism，T-RFLP)技术分析富营养化水体中水葫芦根际和水葫芦近、远水样的细菌群落特征及多样性，结合克隆文库技术和培养法分析根际的细菌种群类型。【结果】同一时期水葫芦根际细菌多样性(Shannon-Weiner指数H′或Simpson指数D)更高，水葫芦近水样次之，远水样最小。10月份的细菌多样性高于5月份的。通过水葫芦根际细菌的克隆文库可知变形杆菌门(Proteobacteria)是水葫芦根际细菌的主要类群，占总群体的65.1%，包括噬菌弧菌(Bacteriovorax sp.)、Dechloromonas sp.、Leptothrix sp.、红螺菌科(Rhodospirillaceae)、Rhodoferax sp.和红环菌科(Rhodocyclaceae)等。T-RFLP图谱显示159 bp为最大优势菌，247 bp为第二大优势菌，对照克隆文库及培养结果分析247 bp属于γ-Proteobacteria，159 bp为不动杆菌(Acinetobacter sp.)。【结论】水葫芦根际细菌的群落结构丰富，不同时段水葫芦根际细菌的丰度略有变化，主要类群为变形杆菌门。

摘要:【目的】克隆表达一种Arthrobacter arilaitensis NJEM01来源的耐有机溶剂β-呋喃果糖苷酶(β-FFase)，纯化并进行结晶条件的研究。【方法】构建pelB信号肽与β-FFase融合表达质粒pET22b-pelB-bff，将其导入Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达，硫酸铵沉淀、DEAE阴离子交换色谱两步纯化重组蛋白，采用坐滴式气相扩散法对β-FFase进行结晶条件筛选和优化。【结果】构建重组质粒pET22b-pelB-bff，通过优化诱导表达条件，IPTG浓度0.1 mmol/L，诱导温度30 °C，诱导时间10 h，比活力高达108 U/mg，实现了果糖苷酶的胞外可溶性表达，纯化获得达到结晶纯度的β-FFase。结晶条件初筛和优化后获得可培养β-FFase晶体的条件为0.15 mol/L氯化钙，0.1 mol/L HEPES pH 6.7，26%聚乙二醇400。晶体衍射分辨率可以达到2.1 ?。【结论】高糖苷合成能力β-FFase表达纯化体系的构建和结晶条件的初步研究，为从结构生物学角度进一步研究果糖苷酶结构与功能的关系，定向进化提高糖苷酶转糖基活性奠定了基础。

摘要:【目的】从海洋来源的罗尼氏弧菌菌株BY中克隆得到一个具有琼胶酶活性的新基因，并对其进行重组表达。【方法】对实验室保藏的产琼胶酶菌株BY进行16S rRNA基因序列分析，并构建系统发育树。根据已报道的琼胶酶基因序列的同源性，设计简并引物，利用降落PCR (Touch-down PCR)及染色体步移技术扩增琼胶酶基因序列全长，对基因序列进行生物信息学分析。将目的基因插入pET22a(+)载体，转化大肠杆菌BL21(DE3)，对重组酶进行表达，利用DNS法测定了重组酶的酶活，对该重组琼胶酶酶学性质进行研究。【结果】克隆得到一条新的琼胶酶基因，命名为Vibrio sp. BY (GenBank登录号：AIW39921.1)，Vibrio sp. BY基因序列全长2 232 bp，编码744个氨基酸，理论分子量为85 kD，Vibrio sp. BY的氨基酸序列基因库中与已知的琼胶酶氨基酸序列Vibrio sp. EJY3的相似度为86%。发酵液琼胶酶酶活力为71.73 U/mL，证明表达的蛋白为琼胶酶。酶学性质研究表明重组琼胶酶的最适温度及pH分别为50 °C和7.0，并且具有较好的稳定性。【结论】利用染色体步移技术克隆得到一条新的琼胶酶基因，并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了重组表达，为琼胶酶的应用奠定了基础。

摘要:【目的】克隆半纤维素降解高效菌株Bacillus subtilis BE-91的甘露聚糖酶基因并进行原核表达，对表达产物进行酶学性质研究。【方法】采用PCR扩增法从B. subtilis BE-91菌株中克隆β-甘露聚糖酶基因，分别连接到pEASY-E1和pET28a载体，导入Escherichia coli BL21(DE3)进行诱导表达。用DNS法对工程菌株的胞内和胞外β-甘露聚糖酶进行定量分析，选取胞外甘露聚糖酶活力高的组分进行酶学性质研究。【结果】从B. subtilis BE-91菌株中克隆的β-甘露聚糖酶基因(GenBank登录号：KP277209)在E. coli中获得高效表达，工程菌株pEASY-man/BL产胞外β-甘露聚糖酶的活性可达229.1 IU/mL；该基因序列全长960 bp，包含319个氨基酸的编码序列和一个终止密码子；表达产物的最适反应温度为65 °C，最适反应pH为6.0，属于耐热偏酸性β-甘露聚糖酶；该酶稳定温度≤65 °C，稳定pH为4.5?7.0；1 mmol/L的Cu2+、Mn2+、Zn2+、Ca2+对该酶有激活作用，而Ba2+和Pb2+有强烈抑制作用。【结论】B. subtilis BE-91拥有珍贵的β-甘露聚糖酶基因资源，其胞外表达产物的耐热偏酸性酶学性质在开发饲料添加剂方面具有潜在的应用前景。

摘要:【目的】从农杆菌介导获得的灰葡萄孢RoseBC-3的突变体库中筛选侵染垫缺失突变体菌株，并明确其相关生物学特性。【方法】将菌株接种于洋葱表皮，利用棉兰染色观察侵染垫形成情况，筛选得到一个侵染垫缺失突变体(AT19)。采用形态学方法、离体叶片接种法、钌红染色法、小麦种子幼芽生长抑制法分别对该菌株的菌落培养性状、侵染垫产生情况、致病力、产果胶酶能力以及产植物毒性代谢产物能力进行测定。【结果】筛选灰葡萄孢突变体168株，根据侵染垫形成可分为三类：快速形成侵染垫型(158株)、缓慢形成侵染垫型(9株)和侵染垫形成缺陷型(1株，AT19)。AT19在接种洋葱120 h后依然无法形成成熟侵染垫。该菌株生长较为缓慢，菌落扩展均匀，可以产生分生孢子，对烟草、草莓、蚕豆和豌豆叶片均不能致病，可以产生果胶酶和植物代谢毒性物质。【结论】突变体菌株AT19可以产生果胶酶和植物代谢毒性物质，其致病力缺失与侵染垫产生缺陷相关。研究结果为了解灰葡萄孢侵染垫形成分子机制提供基础材料。

摘要:【目的】为进一步探究盆栽试验条件下绿色木霉TV41 (Trichoderma viride TV41)对尖孢镰刀菌FW0 (Fusarium oxysporum FW0)在西瓜植株空间分布的影响以及对西瓜枯萎病的防控效果。【方法】通过定期检测不同处理西瓜根际/根表尖孢镰刀菌的数量、西瓜植株根内/茎内尖孢镰刀菌的数量以及植株侧根被侵染比例和尖孢镰刀菌在植株内的侵染进程，进行多次盆栽试验并统计发病率。【结果】当绿色木霉和尖孢镰刀菌接种量均为5×105孢子/g基质时，绿色木霉TV41在西瓜根际/根表的定殖数量明显高于尖孢镰刀菌FW0的数量，接种了绿色木霉TV41的处理，根际/根表尖孢镰刀菌的数量(103 CFU/g基质)显著低于仅接种FW0的对照(104 CFU/g基质)；绿色木霉TV41不仅能够有效减缓尖孢镰刀菌在西瓜植株内的侵染进程，而且能够有效降低西瓜植株根内、茎内尖孢镰刀菌的数量。与对照(只接种FW0)相比，接种绿色木霉后西瓜枯萎病的发病率从66%降低到27%。【结论】绿色木霉TV41能够通过影响尖孢镰刀菌FW0在西瓜植株的空间分布，从而有效防控西瓜枯萎病的发生，防控效果达到60%。

摘要:【目的】马奶酒样乳杆菌ZW3含有一段长度为14.4 kb的胞外多糖合成基因簇，包含17个与胞外多糖合成相关的基因(WANG_1283?WANG_1299)，主要分析17个基因在马奶酒样乳杆菌ZW3生长过程中不同时间段的表达量，探究其中一个表达量发生变化的基因对乳酸菌产胞外多糖的影响。【方法】通过半定量RT-PCR实验，对基因簇上各基因的表达量进行分析；通过构建含有表达量变化基因的重组乳酸乳球菌，比较重组菌与野生菌的产胞外多糖差异。【结果】经分析，WANG_1284、WANG_1286、WANG_1287、WANG_1288、WANG_1290、WANG_1291、WANG_1292、WANG_1294、WANG_1296、WANG_1297、WANG_1298、WANG_1299这12个基因在菌体生长的50 h和60 h (产糖量上升阶段)表达量最高，推测这些基因在多糖聚合过程中起作用。从这12个基因中选出一个表达量发生明显变化的基因WANG_1291做进一步研究。将WANG_1291插入乳酸菌表达载体pMG36e中，构建了重组表达载体pMG36e-1291。将构建的重组表达载体转化到乳酸乳球菌WH-C1中，得到重组菌株。测定重组菌与野生菌生长特性，发现重组菌与野生菌之间的生长速度存在一定差异。然后利用苯酚-硫酸法测得重组乳酸乳球菌的胞外多糖产量是野生菌的2.1倍，胞外多糖产量有了明显的提高。【结论】确定WANG_1291基因是调控马奶酒样乳杆菌ZW3产胞外多糖的关键基因之一。

摘要:【目的】针对采集自福建、广东的34株黑木相思根瘤菌进行分类研究，进一步确定其分类地位，丰富我国黑木相思根瘤菌种质资源。【方法】对选取的34株菌株测定了16S rRNA基因、持家基因atpD和glnII序列，以14株菌为代表菌株分析其系统发育情况。而且选取了部分菌株进行结瘤实验。【结果】16S rRNA基因以及持家基因atpD和glnII的系统发育分析结果与16S rRNA PCR-RFLP分型结果基本一致，14株代表菌株被分为10个不同的类群，其中有2个群组属于中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)，其余群组属于慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)。结瘤试验证明，相关的供试根瘤菌能与黑木相思、银合欢、南洋楹和网脉相思结瘤共生，显示出较广的宿主范围，且对黑木相思和银合欢的促生效果较明显。【结论】研究发现黑木相思根瘤菌具有丰富的遗传多样性和共生多样性。

摘要:【目的】了解美洲大蠊成虫肠道可培养细菌的多样性。【方法】运用纯培养法、数值分类和16S rRNA基因序列的系统发育分析对样品中可培养细菌多样性进行研究。【结果】从NA培养基中分离得到54株细菌，根据形态观察和部分生理生化特性，选取32个代表性菌株进行16S rRNA基因序列的系统发育多样性分析。结果表明，数值分类中的代表菌株在82%相似水平上可分为12个表观群；这些分离菌株代表20个物种，属于4个大的系统发育类群(Proteobacteria，Bacteroidetes，Firmicutes，Actinobacteria)的10个科、15个属。多数菌株属于Proteobacteria门(15株，占46.9%)和Bacteroidetes门(10株，占31.3%)。【结论】美洲大蠊成虫肠道内存在较为丰富的细菌多样性。

摘要:整合性接合元件是近年来在细菌中发现的一种可移动的基因元件，它位于染色体上，可通过接合转移的方式介导细菌间基因的水平转移。这种基因的水平转移有助于细菌适应特定的环境条件，但许多整合性接合元件包含耐药基因，这些遗传元件的水平转移极大地加速了耐药基因在同种及不同种属之间的传播，造成细菌的耐药以至多重耐药问题日益严重，耐药机制日趋复杂；同时整合性接合元件与基因岛有着密切的联系，因此对其特征及转移机制进行研究很有必要。

摘要:多聚磷酸盐(Poly P)广泛分布于真核生物和原核生物中，是由几十个到几百个无机磷酸盐单体通过高能磷酸键聚合而成的线性多聚体。Poly P能影响细菌的毒力，有助于细菌抵抗环境中的压力刺激。在真核细胞中，Poly P与核仁的转录相关，可促进凝血和细胞分化、调节促炎反应，并和骨的重构、矿化及去矿化相关。同时，Poly P也是线粒体通透性转换孔的激活物。本文综合阐述Poly P在微生物及哺乳动物中的作用及相关机制，同时结合我们的研究工作，分析Poly P对大肠杆菌致病性的影响，以期引起研究者对Poly P的关注。

摘要:DNA克隆和组装技术是重要的分子生物学工具。近年来，随着合成生物学的飞速发展，对大片段DNA元件的快速有效组装就显得尤为关键。同时，各种DNA克隆和组装技术也竞相发展起来。通过对基于非典型酶切连接、PCR、同源重组、单链退火拼接等原理发展起来的各种DNA克隆和组装技术进行综述，为合成生物学的进一步发展提供有效的操作工具。

摘要:以模式菌株Shewanella oneidensis MR-1为代表的Shewanella菌属产电微生物广泛分布于自然水体环境中。作为兼性厌氧菌，Shewanella菌除了能进行有氧呼吸外，还能利用多种电子受体进行厌氧呼吸。通过多种细胞色素所组成的复杂电子传递网络，Shewanella菌不仅能利用渗入到周质空间的可溶性电子受体进行厌氧呼吸，更为特殊的是其能够借助电子的跨膜传递实现对胞外不溶性电子受体的异化还原代谢。本文概述了近年来Shewanella菌厌氧代谢途径的研究进展，探讨电子传递网络对Shewanella菌呼吸多样性及环境适应性的影响。

摘要:“微生物学”是高等农业院校的专业基础课。当前，农业院校专业类群复杂，学生个体差异很大，社会竞争力较弱。针对上述问题，基于专业特色和培养目标的差异，在教学大纲、教学内容、教学目标和考核方式等方面采取层次化设计，因材施教，充分发挥学生的能动性，提升教学效果，提高人才培养质量。

摘要:根据发酵工程的课程特点，在课程教学中探索使用PBL教学方法。经过几年的教学实践，逐步形成了“一个问题串联一次课，一个作业串联整个课程”的PBL教学模式。结果显示，通过采用该模式，激发了学生的学习兴趣，提高了学生的自主学习能力、工程应用能力和创新意识，取得了良好的教学效果。

摘要:为进一步提高教学质量，培养高素质人才，高校应加大课程考试改革的力度。本文针对“普通植物病理学”课程考试中存在的主要问题，结合课程教学的特点，坚持理论联系实际，积极探索了贯穿于课程教学全过程，能够促进学生提高能力和素质的多元化的综合考核模式。

摘要:【目的】鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer，RA)是一种重要的禽病病原，分为21个血清型。但一直缺乏一种针对多种血清型广泛适用的抗体检测方法。前期的研究表明，外膜蛋白A (Outer membrane protein A，OmpA)广泛存在于多种血清型的RA菌株中，是一种重要的免疫原性蛋白，并且其基因序列在RA血清型之间具有高度的保守性，提示其可以作为RA感染血清抗体检测的靶点分子。以重组蛋白OmpA建立间接酶联免疫吸附试验检测RA的抗体。【方法】通过诱导表达条件的摸索及蛋白纯化，获得适用于ELISA包被的重组OmpA抗原。通过Western-blot证明重组蛋白OmpA是否与RA多种血清型发生免疫学反应。进行方阵试验以确定ELISA抗原的最佳包被浓度、被检测血清的反应浓度。重复性、特异性和敏感性试验检查该方法的实用性。【结果】实验证实加入1%乙醇的诱导培养基有利于重组蛋白的可溶性表达。Western-blot结果表明，重组蛋白OmpA可以与1、2、6、10、11、13、14和17型多种RA主要流行血清型有良好的免疫反应性。经方阵试验确定抗原的最佳包被浓度为8 mg/L，待检血清的最佳稀释度为1:160。所建立检测方法具有良好的重复性、特异性和敏感性。【结论】实验建立的鸭疫里氏杆菌多种血清型间接ELISA检测方法可以用于免疫后抗体消长以及感染性抗体的检测。