科微学术

微生物学通报

  • 2014年第41卷第8期文章目次
    全 选
    显示方式: |
    • 41(8)封面

      2014, 41(8).

      摘要 (1058) HTML (0) PDF 244.24 K (1409) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 41(8)目录

      2014, 41(8).

      摘要 (1084) HTML (0) PDF 267.13 K (1642) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • >工业微生物学
    • 米曲霉(Aspergillus oryzae) RIB40全长cDNA文库的构建

      2014, 41(8):1485-1490. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130696 CSTR: 32113.14.j.MC.130696

      摘要 (1833) HTML (0) PDF 676.64 K (2983) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】构建米曲霉RIB40的全长cDNA表达文库,为米曲霉功能基因的开发以及次生代谢产物合成途径相关基因的筛选与克隆奠定基础。【方法】采用RNAiso法从米曲霉RIB40菌体中提取总RNA。选用PolyATract mRNA Isolation System III试剂盒分离纯化mRNA。以5 μg mRNA为模板,按照ZAP-cDNA Synthesis Kit试剂盒说明书要求合成单、双链cDNA,使用CHROMA SPIN-400柱离心层析纯化后连接于Uni-ZAP XR表达载体上,体外包装后转染Escherichia coli XL1-Blue宿主菌。【结果】构建了米曲霉RIB40的全长cDNA文库,初级文库滴度约为2.96×106 CFU/mL,重组率约为97.8%,插入片段平均长度大于1.5 kb,达到一个高质量cDNA文库的要求。文库扩增后,滴度达到3.4×1010 CFU/mL。【结论】米曲霉RIB40全长cDNA表达文库的成功构建,将会对米曲霉基础生物学研究及相关基因的筛选与克隆奠定 基础。

    • 地衣芽胞杆菌来源角蛋白酶N端对活力及其热稳定性的影响

      2014, 41(8):1491-1497. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130600 CSTR: 32113.14.j.MC.130600

      摘要 (1633) HTML (0) PDF 3.11 M (2833) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】通过对一株地衣芽孢杆菌来源的角蛋白酶N端进行分子改造,研究其对角蛋白酶活力和热稳定性的影响,进而提高角蛋白酶的热稳定性。【方法】将角蛋白酶N端前5个氨基酸进行分段缺失,并通过序列比对将N端的前5个氨基酸替换为来源于Thermoactinomyces vulgaris的嗜热蛋白酶的N端,将野生型和突变体角蛋白酶基因在枯草芽孢杆菌WB600中进行表达,并对重组酶进行纯化与酶学性质研究。【结果】角蛋白酶N端不同长度的缺失大幅度地降低了角蛋白酶的活力,其中缺失前5个氨基酸完全丧失了酶活力。将角蛋白酶N端前5个氨基酸替换为嗜热蛋白酶N端前12个氨基酸,虽然降低了近70%的活力,但是却增加了角蛋白酶的热稳定性,60 °C条件下的半衰期t1/2由原来的9 min提高到20 min。【结论】角蛋白酶的N端对其酶活力具有较大的影响,与嗜热蛋白酶来源的N端进行替换可以有效提高角蛋白酶的热稳定性。

    • 浓香型白酒两个产区窖泥微生物群落结构分析

      2014, 41(8):1498-1506. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130640 CSTR: 32113.14.j.MC.130640

      摘要 (2283) HTML (0) PDF 1.01 M (3556) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】探索浓香型白酒两个典型产区窖泥微生物群落结构和多样性,分析窖泥微生物群落地域特征及对白酒风格形成的影响。【方法】分别提取四川和安徽两个产区窖泥样品总DNA,应用PCR-ARDRA和16S rRNA基因克隆测序技术对两个产区窖泥细菌和古菌进行研究。【结果】两个浓香型白酒产区窖泥细菌丰富,包括:厚壁菌门(Firmicute)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、绿弯菌门(Chloroflexi)、互养菌门(Synergistetes)、Armatimonadetes类群和未分类细菌(Unclassified bacteria)。两个产区窖泥绝对优势种群均为厚壁菌门中梭菌纲(Clostridia)细菌,在四川产区窖泥中检出较多的互营单胞菌属(Synthrophomonas)和紫单胞菌属(Petrimonas)。古菌的群落组成较为简单,主要是甲烷囊菌属(Methanoculleus)、甲烷八叠球菌属(Methanosarcina)、甲烷鬃菌属(Methanosaeta)和甲烷杆菌属(Methanobacterium) 4个产甲烷古菌类群,四川产区窖泥优势古菌为甲烷囊菌和甲烷八叠球菌,安徽产区则为甲烷八叠球菌属和甲烷鬃菌。【结论】四川和安徽两个产区窖泥微生物的16S rRNA基因克隆文库系统地反映了两者微生物群落的相似性和差异性,对揭示浓香型白酒两个产区的酒体风格差异形成有一定的参考价值。

    • 木薯粉同步糖化发酵(SSF)产丁二酸

      2014, 41(8):1507-1515. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130712 CSTR: 32113.14.j.MC.130712

      摘要 (1952) HTML (0) PDF 517.04 K (3040) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】通过优化产琥珀酸放线杆菌GXAS137同步糖化发酵木薯粉产丁二酸的发酵培养基,提高丁二酸产量,降低生产成本。【方法】在单因素试验的基础上,先利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响丁二酸发酵的重要参数,再采用正交试验确定重要参数的最佳水平。【结果】价格低廉玉米浆可用作氮源,影响丁二酸产量的重要参数是木薯粉、玉米浆、碱式碳酸镁和糖化酶浓度。最佳条件为(g/L):木薯粉100,玉米浆14,糖化酶2.0 AGU/g底物,碱式碳酸镁75。优化后丁二酸产量达到69.31 g/L,丁二酸得率为90.01%,生产强度为1.44 g/(L·h)。与初始条件(52.34 g/L)相比,丁二酸浓度提高了32.42%。并利用1.3 L发酵罐对SSF与SHF两种发酵工艺进行了比较,SSF丁二酸产量(72.21 g/L)远高于SHF (56.86 g/L)。【结论】产琥珀酸放线杆菌同步糖化发酵木薯粉丁二酸产量高,生产成本低,具有较好的工业化应用前景。

    • >海洋微生物学
    • 响应面法优化海洋镰刀腐皮菌产出HMG-CoA还原酶抑制剂的培养条件

      2014, 41(8):1516-1524. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130727 CSTR: 32113.14.j.MC.130727

      摘要 (1739) HTML (0) PDF 1.91 M (2696) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】采用响应面法对海洋微生物镰刀腐皮菌FG319发酵产生MFS (Metabolite of Fusarium solani FG319)培养条件进行优化。【方法】在单因素试验结果的基础上,依据Box-Behnken中心组合原则设计诱导物添加量、培养时间、培养温度的3因素3水平响应面实验,以MFS产出量为响应值优化镰刀腐皮菌FG319的培养条件。【结果】镰刀腐皮菌FG319最优培养条件为诱导物添加量0.6%、培养时间7 d、培养温度22 °C,在此培养条件下,MFS最高产量达到20.11 mg/L,是优化前的4倍,与理论预测的相对误差为0.64%,实测值与响应面预测值拟合良好。镰刀腐皮菌FG319代谢产物MFS在HMG-CoA还原酶和NADPH构筑的分子评价反应体系,当MFS添加到100 mg/L时,具有类似洛伐他汀抑制HMG-CoA还原酶的最大抑制率。【结论】响应面试验设计对镰刀腐皮菌FG319培养条件的优化是有效的,其次生代谢产物MFS体外抑制HMG-CoA还原酶的效果也是明显的。

    • >环境微生物学
    • 复合菌在浓香型白酒丢糟处理中的应用

      2014, 41(8):1525-1531. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130647 CSTR: 32113.14.j.MC.130647

      摘要 (1439) HTML (0) PDF 331.46 K (2611) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】探讨酵母、细菌用于浓香型白酒丢糟处理的应用效果。【方法】对分离自浓香型白酒酿造环境并经多级筛选得到的3株细菌及2株酵母,在不添加任何辅料的情况下,采用不同组合方式,以2%接种量接种丢糟,检测其对丢糟主要成分的影响。【结果】研究发现所有复合菌均可使丢糟酸度及纤维素含量下降,同时能有效增加丢糟蛋白质含量,其中复合菌B5可使其丢糟纤维素降解23.89%,B4可使丢糟蛋白质提高74.01%,达到17.792%。【结论】复合菌在丢糟饲料或有机肥生产中具有很好的应用价值。

    • 一株高效DEHP降解菌的分离、鉴定及其降解特性

      2014, 41(8):1532-1540. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130625 CSTR: 32113.14.j.MC.130625

      摘要 (2102) HTML (0) PDF 645.00 K (3125) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】分离得到高效的邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)降解菌。【方法】采用富集培养法筛选分离菌株,并对菌株进行驯化;通过PCR扩增得到其16S rRNA和gyrB基因序列,进行同源序列分析及分子系统发育树的构建,同时结合形态学观察和生理生化实验对菌株进行初步鉴定;采用高效液相色谱(HPLC)分析菌株对DEHP的降解特性。【结果】分离得到一株能以DEHP为唯一碳源和能源生长的菌株,命名为HS-NH1,初步鉴定其为戈登氏菌(Gordonia sp.)。菌株HS-NH1最适的生长和降解条件为30 °C、pH 7.0,在此条件下,该菌株60 h内能够将浓度为500 mg/L的DEHP降解90%以上。高效液相色谱(HPLC)分析表明,菌株HS-NH1在降解DEHP过程中产生了一种重要的中间代谢产物——邻苯二甲酸。底物广谱性试验证明,菌株HS-NH1能够有效地利用多种常见的邻苯二甲酸酯(PAEs)与芳香族衍生物。【结论】筛选得到了一株DEHP降解菌Gordonia sp. HS-NH1,该菌降解效率高,具有良好的底物广谱性,在邻苯二甲酸酯类化合物的污染治理中将会有一定的应用潜力。

    • 阿特拉津降解菌Acinetobacter sp. DNS32对无机氮源的响应

      2014, 41(8):1541-1546. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130629 CSTR: 32113.14.j.MC.130629

      摘要 (1480) HTML (0) PDF 403.73 K (2289) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】研究Acinetobacter sp. DNS32的生长、阿特拉津降解能力和降解基因转录水平的表达对无机氮素的响应关系,为菌株的工程应用提供指导与理论基础。【方法】以Acinetobacter sp. DNS32为对象,采用摇瓶法研究菌株在阿特拉津培养基中菌株生长情况及降解能力对外加硝态氮与铵态氮的响应关系,利用荧光定量PCR技术检测DNS32降解基因表达量对外加无机氮源的响应关系。【结果】外加无机氮源可以促进DNS32菌株的生长,提高阿特拉津降解能力,无机氮源对DNS32菌株的trzN、atzB和atzC 3种降解基因表达均有促进作用,加入无机氮源的试验处理中DNS32菌株trzN基因的表达量最高可达对照的11.252±2.408倍,推断DNS32菌株的这3种降解基因所编码的酶是稳定表达的组成酶。【结论】DNS32降解阿特拉津不受“氮饥饿”诱导机制调控,且无机氮源的存在对菌株的生长与降解有促进作用,因此菌株在土壤修复实践中具有广阔的应用前景。

    • 内蒙古鄂尔多斯一古盐湖真菌多样性及其功能酶的初步筛选

      2014, 41(8):1547-1555. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130692 CSTR: 32113.14.j.MC.130692

      摘要 (1766) HTML (0) PDF 483.79 K (3134) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】探索内蒙古鄂尔多斯一古盐湖土壤沉积物和湖水样品中的真菌多样性,并初步筛选出产功能酶的活性菌株。【方法】采用含有2.5%、5%、10%及15% NaCl的3种分离培养基,利用稀释平板法分离可培养真菌,基于形态学和ITS序列分析对获得菌株进行系统分类学分析。利用6种筛选培养基定性检测盐湖真菌的产酶活性。【结果】共分离到2 121株真菌,共45个形态种,根据形态学研究和ITS序列的系统分类学分析将其归类为27个属,优势属为曲霉属(Aspergillus)。功能酶筛选结果表明,45个形态种中有22个形态种具有产酶活性,其中6个形态种只产蛋白酶,6个只产纤维素酶,2个只产复合酶,1个只产淀粉酶。有4个形态种可同时产3种酶,有3个可同时产2种酶。【结论】内蒙古鄂尔多斯地区盐湖中真菌多样性丰富,产酶特性良好,研究工作为耐(嗜)盐真菌资源的进一步开发和利用提供依据。

    • 一株亚硝酸盐降解真菌Aspergillus parasiticus JFS的筛选及鉴定

      2014, 41(8):1556-1563. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.140330 CSTR: 32113.14.j.MC.140330

      摘要 (1667) HTML (0) PDF 10.59 M (6181) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】筛选可降解亚硝酸盐的菌株。【方法】利用亚硝酸盐选择培养基从水样、土样、朽木等20多个样品中筛选目的菌株。利用盐酸萘乙二胺法检测目的菌株在亚硝酸盐液体培养基中降解亚硝酸盐的能力,利用镉柱还原法和试纸法鉴定亚硝酸盐被目的菌株代谢后的产物;利用菌落形态、菌丝及分生孢子形态、ITS DNA序列、β-Tubulin gene序列及Calmodulin gene序列分析等鉴定目的菌株。【结果】得到一株可强烈降解亚硝酸盐的真菌菌株JFS,其能在亚硝酸盐浓度高达20.0 g/L的液体培养基中很好的生长,菌株JFS将亚硝酸盐降解为无毒的硝酸盐和铵根离子。结合形态学、对培养基的要求及上述3个基因序列的进化树分析,该菌株属于寄生曲霉菌(Aspergillus parasiticus)。【结论】菌株JFS具有强烈的降解亚硝酸盐的能力。

    • >基因克隆及功能研究
    • 一株链霉菌菌株NCPC-1020中棘白霉素B脱酰基酶基因的克隆与功能分析

      2014, 41(8):1564-1573. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130660 CSTR: 32113.14.j.MC.130660

      摘要 (1739) HTML (0) PDF 1.66 M (3138) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】从一株土壤放线菌来源的野生型链霉菌菌株NCPC-1020中克隆一个具有棘白霉素B脱酰基酶活性的新基因。【方法】采用Degenerate和TAIL PCR两种方法,从链霉菌菌株NCPC-1020基因组中快速克隆获得了该基因序列,然后将基因在变铅青链霉菌TK24中进行异源表达,并进行全细胞催化底物脱酰基反应,采用LC-MS检测反应产物。【结果】LC-MS检测证实,棘白霉素B结构中脂肪链被酶促水解,从而证实该基因具有脱酰基酶活性。【结论】采用Degenerate以及TAIL PCR的方法能够快速获得未知功能的新基因。此基因的克隆,奠定了进行半合成棘白霉素类药物的研发基础。

    • >农业微生物学
    • 内生拮抗放线菌FRo2的鉴定及抑菌活性物质的分离

      2014, 41(8):1574-1581. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130672 CSTR: 32113.14.j.MC.130672

      摘要 (2126) HTML (0) PDF 724.31 K (3131) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】鉴定从东乡野生稻根部分离得到的对多种农作物病原真菌具有拮抗活性的内生放线菌株FRo2,并对其抑菌活性物质进行分离。【方法】根据FRo2形态特征观察、生理生化特性、细胞壁组分和16S rRNA基因序列对其进行鉴定。采用管碟法和菌丝生长速率法测定了该菌株的抗菌活性,活性追踪法结合正相硅胶柱层析及凝胶(Sephadex LH-20)柱层析等技术对抑菌组分进行分离,并通过NMR对抑菌活性物质进行解析。【结果】菌株FRo2属于链霉菌属,与娄彻氏链霉菌(Streptomyces rochei)极为相似。该菌株发酵液对小麦赤霉菌、立枯丝核菌等7种主要农作物致病菌具有较好的抑制活性;从菌株FRo2发酵液中分离得到抑菌活性化合物AW2,结构鉴定为邻苯二甲酸二丁酯。【结论】研究阐明了内生放线菌FRo2抑菌活性物质,也为该菌今后的农业生防应用提供物质基础。

    • 禾谷炭疽菌RGS蛋白生物信息学分析

      2014, 41(8):1582-1594. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130703 CSTR: 32113.14.j.MC.130703

      摘要 (1810) HTML (0) PDF 21.57 M (2377) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】明确禾谷炭疽菌中存在的典型RGS,及其信号肽、跨膜区、二级结构特征,明确该菌RGS与其他病菌之间的关系,最终为深入开展RGS定位、功能研究打下坚实的理论基础,也为进一步开展其他炭疽菌的研究提供重要的理论指导。【方法】基于酿酒酵母中已经报道的4个典型RGS序列,利用BLASTp以及关键词对禾谷炭疽菌蛋白质数据库进行比对、搜索,以及通过SMART保守结构域分析。同时,通过对禾谷炭疽菌中典型RGS氨基酸序列进行细胞信号肽、跨膜区结构以及二级结构等生物信息学分析,此外,通过对禾谷炭疽菌中的典型RGS与其他物种中的同源序列进行遗传关系比较分析。【结果】明确禾谷炭疽菌存在6个典型的RGS,上述RGS在蛋白质二级结构中均含有较高比例的a螺旋结构,而在信号肽方面,除CgRGS6含有明显的信号肽序列外,其他RGS则没有;6个RGS中3个定位在细胞核中,其他则定位在质膜、内质网、线粒体上。【结论】禾谷炭疽菌中的RGS与C. higginsianum、C. gloeosporioides Cg-14/Nara gc5、C. orbiculare等炭疽菌属中的病菌具有较高的同源序列,以及较近的亲缘关系。

    • 一种大连细叶早熟禾内生真菌的形态学和系统发育学研究

      2014, 41(8):1595-1604. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130812 CSTR: 32113.14.j.MC.130812

      摘要 (1576) HTML (0) PDF 8.82 M (2044) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】鉴定分离自辽宁省大连市细叶早熟禾中的内生真菌。【方法】在辽宁省大连市的黄金山和白玉山采集细叶早熟禾(Poa angustifolia L.),通过显微镜观察植物是否含菌,统计样品中内生真菌的检出率;从含菌样品中分离内生真菌,纯化后在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上培养3周,测定分离菌株的形态学特征;运用IQS法提取分离菌株的总DNA,利用特异性引物扩增分离菌株的β-Tubulin (tubB)和Translation elongation factor 1-α (tefA)基因片段,利用DNAssist 2.2和ClustalX 1.81软件进行序列的多重比对和分析,运行PAUP4beta10、MrModeltest 2.3选择合适的模型,用MrBayes 3.1.2构建最大似然树,分析分离菌株的系统发育学特征。【结果】共采集植物样品262个,其中内生真菌的检出率达57.3%;根据分离地点和菌落特征筛选和纯化了10个分离菌株,选用其中6个分离菌株进行形态学特征的调查,发现分离菌株呈典型的Neotyphodium属形态学特征,进而和其他宿主为早熟禾属植物的内生真菌进行比较,发现分离菌株的特征与Epichlo? liyangensis相近,但分生孢子较小[(5.3±0.3) μm×(2.9±0.2) μm],生长速度稍慢(每周8.7±1.4 mm);基于5个分离菌株tubB和tefA片段序列的系统发育学特征显示,它们的tubB和tefA序列分别为单拷贝,并与E. liyangensis中的第二拷贝聚为一类。【结论】分离菌株在原始宿主植物上没有形成子座,分离菌株的形态学特征和系统发育学特征均与E. liyangensis有明显差异。兼顾其它早熟禾属植物内生真菌的宿主植物的种类和地理分布特征,这些菌株有可能属于一个新的内生真菌类群。

    • >兽医微生物学
    • 免培养法研究野生川金丝猴肠道内生细菌多样性

      2014, 41(8):1605-1612. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130710 CSTR: 32113.14.j.MC.130710

      摘要 (2080) HTML (0) PDF 1.82 M (3646) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】了解野生川金丝猴(Rhinopithecus roxellana)肠道内生细菌的组成及其多样性。【方法】提取川金丝猴肠道内生细菌总DNA,选用细菌通用引物799F和1492R对总DNA进行16S rRNA基因特异性扩增,构建川金丝猴肠道内生细菌16S rRNA基因克隆文库,对阳性克隆进行限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)分析,并对Hae Ⅲ酶切带谱菌株进行测序,构建系统发育树。【结果】根据酶切带谱分析和测序结果,将随机挑取的157个阳性克隆归为27个不同的可操作分类单元(OTUs)。系统发育分析表明这些克隆序列有62.10%属于厚壁菌门(Firmicutes),其中包括梭菌属(Clostridium)、Cellulosilyticum属、Robinsoniella属、Anaerofustis属、Blautia属和Anaerovorax属,有37.90%属于未培养细菌。【结论】川金丝猴肠道内生细菌多样性丰富,并且可能存在新的分类单元。

    • >药物微生物学
    • 以结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶为靶点的抗结核药物筛选及其与D-环丝氨酸的共结晶

      2014, 41(8):1613-1620. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130667 CSTR: 32113.14.j.MC.130667

      摘要 (1684) HTML (0) PDF 1.82 M (2884) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】阐释结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶原有抑制剂D-环丝氨酸的作用机制,建立丙氨酸消旋酶抑制剂的高通量筛选模型,并用此模型筛选到新的抑制剂分子。【方法】将结核分枝杆菌中丙氨酸消旋酶基因克隆到pET-28a表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中得到可溶性的大量表达。表达后的蛋白质通过镍离子亲和层析和阴离子交换层析得到纯化,一方面将纯化后的蛋白和D-环丝氨酸共结晶以解析其抑制剂作用的分子机制。另一方面建立并优化丙氨酸消旋酶抑制剂的高通量筛选体系,用D-环丝氨酸验证体系的可行性并用该体系筛选本实验室药物库中的384种小分子片段、792种化合物及2 200种中药样品。【结果】得到的共晶晶体衍射能力2.50 ?,晶体空间群为P41212,晶胞参数a=b=163.92 ?, c=57.44 ?。结构分析表明,D-环丝氨酸进入活性位点之后与磷酸吡哆醛相互作用形成磷酸吡哆胺,使得磷酸吡哆醛的C4?原子与K42之间的相互作用被破坏,从而改变了结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶的活性中心氢键网络。同时经D-环丝氨酸验证建立的抑制剂筛选体系可行,获得阳性化合物分子2个。【结论】依据我们所建立的高通量筛选体系可以有效地为结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶筛选到可信的抑制剂分子。

    • 高产纤溶酶菌株CNY16发酵条件优化及其酶学特性初步研究

      2014, 41(8):1621-1628. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130768 CSTR: 32113.14.j.MC.130768

      摘要 (1725) HTML (0) PDF 2.15 M (2404) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】通过响应面试验对产纤溶酶菌株CNY16发酵条件进行优化,并对其酶学特性进行初步研究。【方法】采用Plackett-Burman设计得出酵母膏、氯化钠、转速3个最重要影响因素,通过最陡爬坡实验逼近酶活的最高区域,然后根据Box-Behnken中心组合设计实验对显著因素进行优化分析,最后对该酶学性质进行初步分析。【结果】最终得到3个因素的最优组合:酵母膏3.28%,氯化钠1.14%,转速166 r/min,在此培养条件下,纤溶酶活达到875.932 U/mL,比优化前提高了46%;该菌株产纤溶酶最适温度为30 °C,最适pH为6.5。【结论】确定了高产纤溶酶菌株CNY16的最优发酵条件及其部分酶学性质,为该酶的进一步深入研究及中试实验奠定基础。

    • >医学微生物学
    • 肝硬化大鼠细菌易位以及甜菜碱的干预作用

      2014, 41(8):1629-1636. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.140387 CSTR: 32113.14.j.MC.140387

      摘要 (1656) HTML (0) PDF 22.31 M (1838) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】研究肝硬化大鼠的细菌易位情况,并探讨甜菜碱对其的干预作用。【方法】随机将48只健康雄性SD (Sprague dawley,SD)大鼠分为四组:正常对照组(N),甜菜碱干预的正常对照组(NB),肝硬化模型组(M),甜菜碱干预的肝硬化模型组(MB)。采用复合致病因素法诱导大鼠肝硬化,NB组和MB组使用1 000 mg/(kg w·d)的甜菜碱水溶液灌胃,N组和M组使用等体积饮用水灌胃;HE染色观察肝脏与小肠损伤情况,并检测各组动物脏器指数与细菌易位情况。【结果】M组大鼠体重增长缓慢(与N组比较,4周和6周时间点均P=0,P<0.01);与M组相比,MB组大鼠体重增长较快,至6周时间点体重差异显著(P=0.023,P<0.05)。与N组相比,M组动物4周时间点肝脏指数显著升高(P=0,P<0.01);6周时间点肝脏(P=0,P<0.01)、脾脏指数(P=0.038,P<0.05)均显著升高,肾脏指数显著降低(P=0.019,P<0.05);与M组相比,6周时间点MB组动物肝脏指数(P=0.038,P<0.05)明显降低,肾脏指数(P=0.011,P<0.05)明显升高。M组动物肝、肠组织发生明显病理学改变;MB组动物病理学改变减轻。M组发生细菌易位的大鼠数量升高,4周时主要易位于MLN,6周时主要易位于MLN和肾脏;MB组发生细菌易位的大鼠数量有所减少,其中6周时易位至MLN的大鼠数量明显减少(P=0.046,P<0.05)。【结论】复合致病因素诱导的肝硬化大鼠,发生细菌易位的器官主要是MLN和肾脏,易位的细菌可通过淋巴管道转位,并随肝硬化病程进展趋于严重。甜菜碱除了其转甲基的保护作用以外,很可能还通过对肠道的保护作用,在一定程度上阻止了肝硬化动物细菌易位的发生,从而发挥了对肝脏的保护作用

    • >简报
    • 一株耐辐射新菌种的分离鉴定及其多糖的抗氧化研究

      2014, 41(8):1637-1642. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130648 CSTR: 32113.14.j.MC.130648

      摘要 (1576) HTML (0) PDF 1.84 M (2336) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】确定新疆辐射污染土样中分离筛选获得的一株产多糖的耐辐射菌株W36-1的分类学地位和抗氧化特性。【方法】对该菌株进行的60Co辐照,结合菌落形态和菌丝特征显微观察、Biolog鉴定以及16S rRNA基因序列分析。采用苯酚硫酸法测定其多糖含量,采用Fenton法测定多糖的粗提物对超氧阴离子清除率;用DPPH法测定抗氧化性;采用邻苯三酚自氧化法测定对超氧阴离子的清除率。【结果】 W36-1可耐5 kGy辐照,为一株欧文氏菌属(Erwinia)新种;其粗多糖含量为53.17%,该多糖对超氧阴离子清除率为75.63%,对DPPH清除率为62.43%,羟基自由基去除率为54.89%。【结论】菌株W36-1产的多糖具有抗氧化性。

    • >专论与综述
    • 白念珠菌胞内铁离子存储转运系统的研究进展

      2014, 41(8):1643-1648. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130693 CSTR: 32113.14.j.MC.130693

      摘要 (1752) HTML (0) PDF 411.04 K (3583) 评论 (0) 收藏

      摘要:白念珠菌是一种常见的条件致病性真菌。为了在宿主体内复杂的铁离子微环境中定居、生长和繁殖,该菌在长期的进化过程中演化出一系列复杂的铁离子稳态调控网络,包括位于细胞膜表面的铁离子吸收系统和位于细胞内的铁离子储存、转运及利用系统。本文结合课题组研究工作,简要综述近几年关于铁离子吸收、储存及转运机制的研究进展,主要关注细胞内铁离子的储存、转运,尤其是线粒体在胞内铁离子代谢及稳态维持方面的作用。

    • γ-聚谷氨酸水凝胶研究与应用进展

      2014, 41(8):1649-1654. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130708 CSTR: 32113.14.j.MC.130708

      摘要 (1783) HTML (0) PDF 454.98 K (3833) 评论 (0) 收藏

      摘要:主要介绍了一种集吸水性能、保水性能、环境友好性于一身的高分子材料γ-聚谷氨酸水凝胶的研究现状及发展前景,分别从γ-聚谷氨酸水凝胶、γ-聚谷氨酸与其他物质复合水凝胶的合成以及γ-聚谷氨酸类水凝胶的应用三方面进行了综述。

    • 细菌中黄素单核苷酸核糖开关研究进展

      2014, 41(8):1655-1660. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130668 CSTR: 32113.14.j.MC.130668

      摘要 (1940) HTML (0) PDF 803.09 K (3701) 评论 (0) 收藏

      摘要:核糖开关(Riboswitch)具有RNA结构,是位于mRNA 5′非编码区的RNA传感器。在无任何蛋白质因子参与下,可特异性地直接结合代谢产物,使自身构象发生相应变化,启动或阻断mRNA的转录、翻译、拼接等过程来调控基因的表达。某些Riboswitch可应用于抗菌药物研发。本文综述了Flavin mononucleotide riboswitch (FMN riboswitch)三维结构、基因表达调控的机制及热力学、动力学的研究进展,为基于FMN riboswitch的合理药物设计奠定了基础,并对开发新一代抗菌药物进行了展望。

    • 硝酸盐还原促进毒害性有机污染物降解的研究进展

      2014, 41(8):1661-1666. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130616 CSTR: 32113.14.j.MC.130616

      摘要 (1514) HTML (0) PDF 411.35 K (2816) 评论 (0) 收藏

      摘要:大量具有高毒性、持久性和生物蓄积性的有机污染物被排放到环境中,对生态环境和人类健康造成了严重威胁。近年来,利用硝酸盐作电子受体在厌氧条件下降解毒害性有机污染物,已取得一定的进展。本文综述了硝酸盐还原体系中几种典型毒害性有机污染物(多环芳烃、单环或杂环芳烃类有机物及卤代有机物)的厌氧降解研究进展。在此基础上,提出了硝酸盐还原促进毒害性有机污染物降解研究中存在的主要问题及其在加速污染环境净化方面的应用前景。

    • 噬藻体辅助代谢基因(AMGs)研究进展

      2014, 41(8):1667-1674. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130650 CSTR: 32113.14.j.MC.130650

      摘要 (2118) HTML (0) PDF 306.80 K (2959) 评论 (0) 收藏

      摘要:噬藻体是一类广泛存在于海洋及淡水环境中以蓝藻为感染宿主的病毒,对蓝藻种群结构与多样性以及水生态环境具有重要的影响。噬藻体携带一系列与宿主新陈代谢相关的同源基因被称为辅助代谢基因。它们编码的蛋白在噬藻体感染蓝藻过程中,可参与宿主的光合作用、戊糖磷酸循环、营养物质摄取以及核苷酸生物合成等代谢活动。近年来,一些辅助代谢基因被作为噬藻体分子检测的靶标基因,并用于噬藻体遗传多样性及其与蓝藻间相互关系的研究。本文综述了国内外有关噬藻体辅助代谢基因的来源、生物学功能及其多样性等方面的研究进展。

    • 细菌纤维素性质及应用的研究进展

      2014, 41(8):1675-1683. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130655 CSTR: 32113.14.j.MC.130655

      摘要 (1889) HTML (0) PDF 2.23 M (5520) 评论 (0) 收藏

      摘要:细菌纤维素是由微生物合成的多孔性网状纳米级生物高分子材料,由于它具备高持水性、高透气性、良好生物相容性、高机械强度、三维网络结构等独特性质,因此在纺织、医用敷料、组织工程、食品、导电材料等行业具有广阔的应用前景。本文主要从性质和应用两方面对其近年来的研究进展做了综述,并对未来的发展做了展望。

    • 毕赤酵母过氧化物酶体吞噬的研究进展

      2014, 41(8):1684-1691. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130657 CSTR: 32113.14.j.MC.130657

      摘要 (1573) HTML (0) PDF 401.96 K (2966) 评论 (0) 收藏

      摘要:过氧化物酶体吞噬是生物体的一种重要自我调控方式。过氧化物酶体吞噬是多种吞噬相关蛋白的共同作用,而且吞噬相关蛋白质之间的作用具有严格的时序性。由于毕赤酵母有两种吞噬方式、全基因组序列已知、基因操作技术成熟,所以毕赤酵母是研究过氧化物酶体吞噬的良好素材,也是目前研究的热点。本文对近年来毕赤酵母过氧化物酶体吞噬的启动、两种吞噬类型的形成、过氧化物酶体在液泡中降解的研究进行梳理,为毕赤酵母过氧化物酶体吞噬的进一步研究奠定基础。

    • >生物实验室
    • CAS平板覆盖法检测氢氧化细菌铁载体

      2014, 41(8):1692-1697. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130462 CSTR: 32113.14.j.MC.130462

      摘要 (2210) HTML (0) PDF 1.08 M (5476) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】用CAS平板覆盖法检测氢氧化细菌铁载体,解决通用CAS琼脂平板法中十六烷基三甲基溴化铵对真菌和某些细菌的生长抑制问题。【方法】将改良的CAS检测培养基覆盖在长满菌落的无铁培养基上,生长抑制问题因微生物未与十六烷基三甲基溴化铵直接接触而解决。【结果】3株氢氧化细菌SDW-5、SDW-9和AaP-13均能产生单菌落,加入CAS检测培养基1 h后,菌落周围产生明显的铁载体晕圈。【结论】本方法成功解决了生长抑制问题,可以作为检测微生物铁载体的通用方法。

    • >主编点评
    • 雄黄的生物浸出

      2014, 41(8):1698-1698. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.148008 CSTR: 32113.14.j.MC.148008

      摘要 (1302) HTML (0) PDF 89.11 K (2051) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • >主编点评文章
    • 生物浸出系统中Acidithiobacillus ferrooxidans对雄黄表面改性研究

      2014, 41(8):1699-1709. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130649 CSTR: 32113.14.j.MC.130649

      摘要 (1515) HTML (0) PDF 5.69 M (2906) 评论 (0) 收藏

      摘要:【目的】研究Acidithiobacillus ferrooxidans BY-3对雄黄表面改性作用,为进一步研究雄黄的生物炮制技术提供实验基础与理论依据。【方法】在4组生物浸出体系中(每组包含100 mL无亚铁离子的9K培养基和0.500 g雄黄):第1组无添加;第2组添加4.469 g硫酸亚铁;第3组添加0.100 g硫粉;第4组加入4.469 g硫酸亚铁和0.100 g硫粉。在上述4组中使用A. ferrooxidans BY-3对雄黄进行生物浸出。浸出前后雄黄表面形貌及元素变化,使用扫描电镜(SEM)与能谱仪(EDS)、X-射线衍射(XRD)、拉曼光谱(Raman)、电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-AES)进行分析。【结果】4组浸出体系均发现A. ferrooxidans BY-3粘附于雄黄表面以此来产生直接作用。含Fe2+的浸出体系中雄黄表面产生非常明显的变化,含硫的浸出体系中雄黄表面变化不明显;只有Fe2+存在的浸出体系中As/S比率增高,而其余3组浸出体系中As/S比率均明显下降;另外,改性雄黄的表面存在黄钾铁矾、硫、赤铁矿、针铁矿和磁铁矿等,但未检测到砷华(As2O3)与副雄黄(Pararealgar)。【结论】A. ferrooxidans对雄黄改性具有重要作用。Fe2+对雄黄的改性具有促进作用,而硫对雄黄的改性具有抑制作用。雄黄改性前后的物化分析结果证实了生物浸出技术可有效解决传统方法制备雄黄及贮存过程中氧化和光化问题。

    • >回顾点评
    • 盐性条件下植物内生真菌多样性及其生态学功能研究

      2014, 41(8):1710-1710. DOI: 10.13344/j.microbiol.china.149008 CSTR: 32113.14.j.MC.149008

      摘要 (1462) HTML (0) PDF 109.83 K (2001) 评论 (0) 收藏

      摘要:

本期文章


文章目录


过刊浏览

年份

刊期

浏览排行

引用排行

下载排行