摘要:

摘要:以从太湖蓝藻中提取的微囊藻毒素作为微囊藻毒素降解菌的筛选物质, 通过稀释平板涂布法从腐烂的蓝藻中富集分离到一菌株, 经形态特征、生理生化特征和16S rDNA 序列分析将该菌株(GenBank 序列登录号为GQ143751)鉴定为藤黄微球菌(Micrococcus luteus); 微囊藻毒素降解实验结果表明该菌株几乎不能降解微囊藻毒素, 但可以明显促进一株微囊藻毒素降解菌微嗜酸寡养单胞菌(Stenotrophomonas acidaminiphila)对微囊藻毒素的降解能力, 将筛选菌株与微嗜酸寡养单胞菌混合培养, 混合菌对微囊藻毒素的降解能力比微嗜酸寡养单胞菌单独培养时提高66.7%。

摘要:在大肠杆菌厌氧混合酸发酵途径中, 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PPC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PCK)皆可催化由磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)到草酰乙酸(OAA)的反应。鉴于经由PCK催化的反应伴有ATP的生成, 理论上更有利于菌体生长和产酸, 本研究以大肠杆菌W3110 (△pfl, △ldh)为出发菌株, 利用λ-Red同源重组系统构建了其ppc缺陷菌株并在此基础上过量表达了Bacillus subtilis pck基因。初步的厌氧发酵实验表明: 过量表达pck可在一定程度上恢复初始菌株厌氧代谢葡萄糖的能力。其中又以ppc缺陷株更为明显, 其耗糖能力和产酸能力分别为对照菌株的4.2和15.3倍。

摘要:对酿酒酵母在添加苹果酸、柠檬酸和琥珀酸的混合培养基与其在YEPD培养基中胞内丙酮酸激酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、乙醇脱氢酶的酶活力差异进行了对比分析。结果表明: 添加苹果酸使胞内丙酮酸激酶、异柠檬酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、乙醇脱氢酶的酶活分别下降34.82%、57.23%、39.15%、12.10%; 添加柠檬酸使胞内丙酮酸激酶、异柠檬酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的酶活分别下降50.17%、42.20%、48.40%; 添加琥珀酸使胞内丙酮酸激酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、乙醇脱氢酶的酶活分别下降34.16%、34.16%、50.87%、50.87%、12.37%。丙酮酸激酶、异柠檬酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶对3种有机酸的耐受性较差, 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、乙醇脱氢酶对3种有机酸的耐受具有选择性。

摘要:从云南滇池的水样中分离筛选得到一株自养产油小球藻(Chlorella vulgaris, C. vulgaris), 其油脂产率可达28.6 mg/(L?d), 进一步考察了不同氮源、氮源浓度和添加无机碳源对其自养生长和油脂积累的影响。结果表明, 硝酸钠为优化氮源, 氮元素的优化浓度为123 mg/L, 油脂含量随氮元素浓度升高而降低; 添加NaHCO3显著提高了C. vulgaris生物量产率和油脂产率, 其优化浓度为800 mg/L。在氮源和碳源的优化浓度下, C. vulgaris的最大生物量产率和油脂产率可达332.8 mg/(L?d)和100.2 mg/(L?d), 分别是对照组的3.6和3.4倍。

摘要:以厦门白城海域的潮间带表面沉积物为菌种来源筛选得到一株具有电催化活性的菌株S2, 该菌株的16S rRNA和gyrB基因发育树与Shewanella oneidensis MR-1同支, 相似性分别为98.5%和87%, 葡萄糖、木糖、半乳糖等碳源利用及最佳生长的NaCl浓度与S. oneidensis MR-1有显著差别, 因此初步鉴定为Shewanella 属菌株, 命名为Shewanella sp. S2。初步研究了菌株S2产电活性, 在以乳酸作为碳源产电时, 电压最高为150 mV, 相应的电流密度为66.1 mA/m2。

摘要:本文利用琼脂扩散法测定嗜热链球菌(Streptocccus thermophilus) CGMCC 1.1864发酵上清液的抑菌效果, 结果表明此菌能够产生抑菌物质, 且在排除有机酸和过氧化氢的影响后上清液不但能抑制革兰氏阳性菌, 对革兰氏阴性菌也有抑制能力。此抑菌物质具有热稳定性, 于100°C处理 2 h及121°C处理20 min仍保留抑菌活性, 但若将其在100°C处理2 h的上清液立即置于?20°C保存, 其抑菌活性有较大损失。常温下(37°C), 该抑菌物质在pH 2.0?9.0范围内有很好的稳定性。发酵上清液经各种蛋白酶及?-淀粉酶处理后抑菌活性完全消失, 而对过氧化氢酶不敏感, 表明此抑菌物质为多肽, 属于细菌素, 本文初步将其命名为嗜热链球菌素ST9。由于ST9对其产生菌具有吸附作用, 选择pH吸附释放法对该嗜热链球菌素进行粗提, 然后经SephadexG-25凝胶层析柱除去杂蛋白, 最后冷冻干燥得纯品。通过Tricine-SDS-PAGE分析得到其分子量约为5.0 kD。

摘要:利用荧光探针CFDA-SE标记植物乳杆菌ST-Ⅲ, 测定其对Caco-2细胞粘附能力的变化, 提取相关物质, 探讨其粘附机理。化学和酶处理ST-Ⅲ菌悬液发现, 经胃蛋白酶、胰蛋白酶、氯化锂、苯酚、盐酸胍和热处理能显著降低ST-Ⅲ的粘附性, 表明表面蛋白或脂磷壁酸(Lipoteichoic acid)可能参与了ST-Ⅲ对Caco-2细胞的粘附。粘附抑制试验和可逆性结合实验证实表面蛋白而非脂磷壁酸参与了ST-Ⅲ对Caco-2细胞的粘附。结果表明ST-Ⅲ的表面蛋白粗提物可能含有粘附素类的S-层蛋白(S-layer protein), 经SDS-PAGE电泳分析, 此粗提物主要成分的分子量分别为72.7、34.1和24.3 kD。

摘要:研究了镁对蜜环菌生长的影响, 蜜环菌对于镁的耐性和富集规律, 以及高浓度镁胁迫下蜜环菌的抗氧化酶的变化情况。3?15 g/L的Mg浓度对于蜜环菌菌体的生长有促进作用。Mg浓度19 g/L以上时, 蜜环菌菌体的生长受到抑制。蜜环菌的子实体形成和子实体生物量在Mg的浓度为11 g/L以下时不受影响, 超过11 g/L则子实体不能萌发。皮壳状菌丝和菌索中Mg的含量随培养基中Mg浓度的增大而增大, 培养基Mg浓度达到16 g/L后, 菌丝、菌索中Mg的含量都不再上升。子实体对Mg的富集量比菌丝体小的多, 在培养基Mg浓度在9、10 g/L时, 子实体中Mg的含量与对照组有显著差异。随着培养基中Mg浓度的提高, 菌丝和菌索POD、CAT、SOD活性都有增加, 而且菌丝与菌索之间抗氧化酶活力的差异随着培养基中Mg浓度的提高而增大。

摘要:从自然发酵的豆瓣中筛选出对产毒黄曲霉菌的生长及其毒素合成均有抑制作用的细菌, 在蚕豆天然培养基(BAM)上利用菌落对峙实验初筛和滤纸片复筛得到1株有较高抑制产毒黄曲霉活性的菌株L4。对L4进行形态学、生理生化特征及16S rRNA序列同源性分析, 鉴定此菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。在抑制黄曲霉生长和黄曲霉毒素B1 (AFB1)合成的研究中表明, 在L4与黄曲霉菌共同培养15 d后, 黄曲霉菌丝产量和黄曲霉毒素B1 产量均比黄曲霉单独培养时显著降低(P < 0.01), AFB1合成受到明显抑制, 抑制率达93.7%。当黄曲霉孢子液与L4发酵上清液1: 1 (V/V)混合后接种在玉米粒上时, 黄曲霉在玉米上的生长和孢子萌发均得到完全抑制。

摘要:从土壤中分离并筛选得到了一株α-糖苷酶抑制剂生产菌PW0852。根据形态特征、培养特征、生理生化特征及16S rRNA序列相似性分析等多相分类方法, 初步判定菌株PW0852为淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)。该菌经10 L发酵罐水平发酵, 发酵液中可积累一定量的α-糖苷酶抑制剂。采用膜过滤技术、离子交换树脂吸附及冷冻干燥等方法, 从PW0852发酵液中分离获得混合型α-糖苷酶抑制剂GIB852。GIB852对人类胰腺α-淀粉酶和α-麦芽糖酶都有明显的抑制作用, 其对麦芽糖酶的抑制性比同剂量的市售双糖酶抑制剂米格列醇强28.7倍, 而对α-淀粉酶的抑制性较弱。通过小鼠糖耐量实验, 发现α-糖苷酶抑制剂GIB852对哺乳动物餐后高血糖的形成有明显改善作用, 具有开发为糖尿病药物的潜力。

摘要:从野生黄芩的根、茎、叶中分离出97株内生真菌, 其中33株来自生长期植株, 64株来自成熟期植株。经分类鉴定, 隶属于38个属, 优势属为Alternaria, 成熟期的属种多样性高于生长期。将其中的95株内生真菌对14种指示菌进行抑菌试验, 发现其中91株内生真菌对一种或多种指示菌具有抑菌活性, 占分离菌株总数的95.8%。野生黄芩内生真菌对大肠杆菌CGMCC1.1103、枯草芽孢杆菌CGMCC1.769、蜡样芽孢杆菌ATCC1361、致病性大肠埃希氏菌ATCC49105、白色假丝酵母ATCC10231、小孢拟盘多毛孢CNUMB2PM01等6个指示菌菌株抑菌效果较好; 对单核细胞增生李斯特菌ATCC27708、普通变形杆菌ATCC33420、肠炎沙门氏菌ATCC14208、副溶血型弧菌ATCC27519、宋内氏痢疾杆菌ATCC51060、九州镰孢霉CNUMB2FK01等6个指示菌菌株抑菌效果较差; 对深红酵母CGMCC2.282和金黄色葡萄球菌ATCC12600没有抑制作用。

摘要:本文探讨了单纯疱疹病毒2型 (HSV-2)潜伏相关转录体 (LAT)的开放读码框2 (ORF2)在细胞中的表达, 及其对5-氟尿嘧啶 (5-FU)诱导的非洲绿猴肾细胞 (Vero)凋亡的影响。通过将重组质粒pEGPF-ORF2转染Vero细胞, 绿色荧光蛋白检测转染效率, RT-PCR验证目的基因的表达, 5-FU 诱导细胞凋亡, 通过荧光显微镜观察凋亡小体, Gimesa染色检测细胞核形态, MTT法检测细胞的存活率, DNA ladder片段分析, 结果表明, 转染后绿色荧光蛋白表达效率很高, RT-PCR验证有目的基因的转录。凋亡诱导后的细胞形态正常, MTT法分析活性率与正常无差异, 而显著高于空质粒组, DNA ladder未见凋亡条带。由此我们认为HSV-2 LAT ORF2 基因在Vero细胞中得到了高效表达, 并且具有抗5-FU诱导的凋亡作用。

摘要:生物吸附是有效处理含较低浓度重金属离子废水的廉价方法之一。本文通过对污水处理厂活性污泥的富集和培养, 经过分离、纯化活性污泥中的细菌, 最终得到了趋磁细菌MTB-11s。通过16S rDNA鉴定, 菌株MTB-11s属于代尔夫特菌属。对趋磁细菌的生物吸附性能进行了研究, 实验结果表明, 趋磁细菌MTB-11s对不同金属离子具有选择吸附特性, 其对银离子的吸附表现为快速过程, 温度对其吸附性能的影响较小, pH值为4?8时吸附率较高; 随着干菌浓度的增加, 吸附率不断升高, 最终趋于平稳; 随着银离子初始浓度的增加, 吸附率呈现先升高后降低的趋势。在菌量充足或金属离子浓度较低时, 铜、钴离子的存在能促进银离子的吸附, 其他范围则表现为竞争吸附。

摘要:GacA是GacS/A双元调控系统的一个组分, 克隆假单胞菌株M18中的gacA基因。测序结果同Pseudomonas sp. PAO1比较, 该基因2个碱基的改变未引起氨基酸的改变。将该基因克隆到表达质粒pET28b (+)中, 将重组质粒经热激转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中, IPTG诱导表达。表达产物经金属螯合层析柱纯化, 蛋白纯度约为98%, 质谱鉴定证明纯化的蛋白为GacA蛋白。CD谱分析GacA包含了4% α-helix, 48% β-sheet 和48%无规则卷曲。GacA蛋白的获得为进一步研究其晶体结构、生物学性能以及GacS/A双元调控系统奠定了基础。

摘要:采用改良MRS培养基从蒙牛冠益乳酸奶中选择性分离得到2种乳酸菌, 表型特征检测初步确定目标菌株BB-12, 该菌株符合双歧杆菌属特征描述。通过Biolog微生物自动鉴定系统鉴定、16S rDNA序列分析、atpD基因序列分析, 多相鉴定表明: 菌株BB-12为动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)。系统发育学分析表明: atpD基因序列比16S rDNA序列在动物双歧杆菌亚种水平鉴定上有更好的分辨率。

摘要:古菌是区别于真核生物和原核生物的第3种生命形式, 对于揭示全球元素循环、指示地质环境等意义重大, 是目前生物地球化学研究的热点之一, 本文综述了近几十年来, 古菌细胞膜脂应用于生物地质学等方面的研究进展, 并对古菌该研究领域尚待加强的方面进行了评述和展望。

摘要:鱼腥藻7120作为模式生物被广泛用于光合、固氮、进化、代谢等基本生命现象的研究。近几年, 对其基因工程的研究使人们看到它在医药、环保、能源等方面的应用潜力, 但表达效率低是其发展的瓶颈。为了提高其表达效率, 研究者从鱼腥藻7120的载体(包括启动子、复制子、选择标记基因等)的改进、目的基因的优化(密码子和SD序列)、宿主的改善、转化方法的改变等方面进行了大量探索, 除了用于功能基因的研究, 已经有几十个外源基因在鱼腥藻7120中表达。除了研究载体, 诱变鱼腥藻7120形成有利于外源基因表达的突变体和摸索转基因蓝藻最佳生长条件和表达条件, 可能是新的发展方向。

摘要:真菌多糖具有抗肿瘤、抗衰老、免疫调节等多种功效, 有较高的食、药用和商业价值。本文通过对实例的总结, 介绍热水浸提法、稀酸提取法、碱提取法、酶消化提取法等真菌多糖提取技术。通过比较阐述其优缺点、影响因素和适用范围, 为类似试验提供建议。

摘要:探讨了高职生物制药技术专业在当前高职教育理念和产业背景下进行的教学改革。通过分析高职生物制药技术专业进行教改的必要性、依据、理念和特点, 探讨高职生物制药技术专业教学改革中依托行业确立校企合作、工学结合的培养模式、改革课程体系和内容选择、建立独立的以校内外实习实训基地为核心的实践教学平台, 以及改革效果及其展望。

摘要:网络信息技术的快速发展渗入到传统课堂教学, 促使课堂教学的教学理念、教学模式、课堂组织形式发生着变化。本文通过网络环境下“创设情境?提出问题?任务分解?探究协作学习?结论形成?网上评议”六个教学环节作为主线, 提出把网络技术充分融入微生物学课程教学实践中, 实现课程与技术有效整合的教学设计方法。改变现有课程教学方法, 避免教学枯燥性, 给教学带来全新视角, 全方位地提高课程教学质量和效果。

摘要:笔者通过练习、试卷分析以及调查发现, 造成学生学习医学微生物学课程效果不佳的主要原因是主观认识错误、交叉学科之间知识的重复、概念不清、形象思维模糊、知识迁移能力不强或负迁移等一些思维障碍的存在。本文结合该学科的特点对这些思维障碍进行了分析, 并针对性地提出一些补救性和预防性教学对策。

摘要:基因工程处于生命科学的最前沿, 其内容国际前沿性强, 发展和更新迅速。基于培养适应全球化发展的复合型本科生的需要, 福建师范大学生命科学学院生物工程专业自2006年对《基因工程》课程进行双语教学模式的探索。本文根据几年来基因工程双语教学的实践, 介绍了该课程双语教学的体会, 包括教学内容与双语教材选择、教学手段与方式改革以及网络资源的利用等, 并探讨了存在的问题和对策。

摘要:丝状真菌在工业、农业、医药以及基础生物学研究中具有重要作用。利用遗传转化技术对丝状真菌进行菌株改良和基因功能分析, 也越来越受到重视。然而, 丝状真菌DNA提取方法繁琐、费时, 难以满足利用PCR技术高通量筛选转化子的需要。本文以曲霉菌为例建立了一种快速提取丝状真菌DNA的实验方法, 微波处理置于10 × TE buffer中的菌丝即可得到DNA。RAPD试验和PCR扩增证明, 该方法提取的DNA能够达到PCR扩增的要求。研究结果为高通量快速筛选丝状真菌转化子奠定了基础。

摘要:乳酸菌菌株的药敏性评价是目前国际上益生乳酸菌安全性评价的首要内容, 然而用于乳酸菌药敏性测试的相关国际通引标准还未出台。本文就药敏试验使用的培养基进行了探讨, 并从中选取了合适的商品化培养基——RCA用于乳酸菌的药敏性测试。选取的培养基适合目前市场上常用益生菌的生长, 经方法优化后可得到满意的结果, 为今后制定针对乳酸菌的抗菌药物敏感性试验执行标准提供了一定依据。随后采用纸片扩散法对分属于4个属的9株乳酸菌进行了19类51种抗生素的敏感性测定, 较全面地了解了这些菌株的药敏谱。

摘要:建立光合细菌中过氧化物酶的酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)分析方法。以电泳图谱的谱带数和灰度为指标, 运用正交试验和遗传算法对该方法的电泳条件进行优化。实验结果表明, 当凝胶中Triton X-100含量为0.31%、菌体破碎时间为19 min、样品中Triton X-100含量为0.79%时, 可获得清晰的沼泽红假单胞菌过氧化物酶图谱; 当凝胶中Triton X-100含量为0.27%、菌体破碎时间为16 min、样品中Triton X-100含量为0.76%时, 可获得清晰的球形红细菌过氧化物酶图谱。本方法为光合细菌中过氧化物酶的分析提供了一种新的、简单、快速的手段。