2008, 35(2):0161-0165.
摘要:从油田回注水系统加压泵后的管道管壁生物膜垢里分离得到的一株嗜热、嗜酸、异养型硫酸盐还原菌, 编号为CW-04。该菌株兼性厌氧、革兰氏阳性、有极生鞭毛、直或弯曲的短杆状,能产孢子, 最佳生长温度47℃, 在20℃~63℃下培养基中均能使测试瓶有黑色沉淀产生。从腐蚀防治的角度研究该菌株的生长曲线。主要生理生化特性包括: 生长pH范围为3.7~10, 最佳生长pH为6~6.5, 最佳生长盐度为0.7%。能够在H2+醋酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、乳酸盐、丙酮酸盐和乙醇等电子供体中生长, 也能够利用葡萄糖、果糖和简单的氨基酸作为唯一碳源生长; 能够在硫酸钠、硫代硫酸钠、亚硫酸钠等电子受体中生长, 但是不能利用硝酸盐和硫磺。通过16S rDNA测序以及系列比对分析: 该菌属于细菌界(Bacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、梭菌纲(Clostridia)、梭菌目(Clostridiales)、蛋白胨链球菌科(Peptococcaceae)、脱硫肠状菌属(Desulfotomaculum), 与该属中的种Desulfotomaculum aeronauticumd 相似性达到99%。
2008, 35(2):0166-0170.
摘要:从位于西藏自治区澜沧江边一个47℃的盐井中分离筛选到一株耐热嗜盐菌菌株YJ0238, 对其进行了生理生化特性研究, 采用PCR方法扩增其16S rRNA基因序列, 并进行了测定。基于生理生化特性和16S rRNA基因序列的同源性比较, 以及系统发育分析, 发现菌株YJ0238是Idiomarina属中成员zobellii的一个亚种, 其16S rRNA基因序列已被GenBank数据库收录, 序列号为EF693953。迄今为止, 国内极少有关高温、高盐环境中微生物研究的报道, 本研究可为今后研究同类极端环境中新的物种资源以及微生物多样性提供素材和参考。
2008, 35(2):0171-0177.
摘要:为了探索新分离到的3株溶藻细菌胞外溶藻活性物质的分离特性, 选择了对水华鱼腥藻生长无抑制作用的淀粉培养基培养溶藻细菌。采用透析、乙醇沉淀、有机溶剂萃取、活性炭吸附与解吸等方法对其分离特性进行了研究。溶藻细菌L7的溶藻活性物质的分子量小于3.5 kD, 溶藻细菌L8、L18的溶藻活性物质的分子量在3.5 kD~7 kD之间; 3株溶藻细菌的胞外溶藻活性物质不能用乙醇沉淀法完全分离; 3株溶藻细菌的溶藻活性物质具较好的亲水性和较强的极性, 且都不能被活性炭吸附。
2008, 35(2):0183-0187.
摘要:为更好的进行钾素营养有关基因表达调控和功能性研究, 我们采用同源重组法通过重叠引物扩增分别将URA3和HIS3基因替代酿酒酵母的TRK1和TRK2基因, 并以酿酒酵母的尿嘧啶合成酶URA3基因和组氨酸合成酶HIS3为标记基因, 在不含尿嘧啶和组氨酸的基本培养基筛选转化子获得了钾离子转运蛋白TRK1和TRK2基因缺失的酿酒酵母钾素营养缺陷型菌株, 该菌株在低K+培养基中导入拟南芥K+转运体基因AtKuP1可恢复正常生长。
2008, 35(2):0188-0192.
摘要:采用休止细胞梯度生长法, 对工业糖蜜酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株进行高浓度酒精、高温和高渗透压, 以及糠醛毒性、苯酚毒性、乙酸毒性和抗生素G418毒性的耐受性分析。结果表明, 所测定的工业酵母菌株对这些逆境条件的耐受性有明显的差别; 其中AS2.1189和AS2.1190对测定的胁迫条件均表现出相对较好的耐受性; 396对乙酸毒性和G418毒性具有很好的耐受性; 2610对高温表现出较强的耐受性。
2008, 35(2):0193-0199.
摘要:从分离自内蒙古传统乳制品的67株乳酸菌中筛选得到一株产生类细菌素的布氏乳杆菌KLDS1.0364, 对其所产类细菌素进行初步分离纯化, 同时研究其所产类细菌素的生物学特性。KLDS1.0364无细胞发酵上清液经阳离子交换树脂纯化后, 采用tricine-SDS-PAGE测定类细菌素分子量, 并测定了类细菌素的部分特性。KLDS1.0364产生的类细菌素分子量约为21.6kD, 对热和pH值稳定, 可被多种蛋白酶失活, 不能被过氧化氢酶和α-淀粉酶失活。KLDS1.0364产生的类细菌素的作用方式是杀菌, 且抑菌谱广, 可抑制多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌。
2008, 35(2):0200-0203.
摘要:研究在发酵培养基中添加色醇对斯达氏油脂酵母发酵的影响。结果表明, 在接种后0 h或12 h时添加色醇, 能够明显抑制菌体生长和油脂积累; 而在培养24 h或36 h添加, 能够明显促进菌体生长, 并增强菌体对底物利用率。与对照组比较, 在36 h添加100 mmol/L色醇, 生物量、油脂量和脂肪系数分别增加7.4%、13.9%和14.2%, 发酵时间缩短13.3%, 明显提高了油脂生产效率。气相色谱分析表明, 添加色醇对菌油脂肪酸组成及其相对含量无显著影响。实验结果有助于建立调控油脂发酵的新策略, 具有重要的理论和工程应用意义。
2008, 35(2):0204-0208.
摘要:从棉花根际分离了1277个细菌分离物, 以棉花立枯病病原真菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn)为靶标菌, 通过平板对峙法获得25个具有拮抗性能的分离物, 其中MH1和MH25具有较强的拮抗性能, 且拮抗性能稳定, 具有较好的生防潜力。经过形态观察、生理生化特征分析及16S rDNA序列分析, MH1为短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis), MH25为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。MH1和MH25的16S rDNA序列在GenBank中注册号分别为: EF488102, EF488103。
2008, 35(2):0209-0214.
摘要:以3株黄瓜尖镰孢菌(Fusarium oxysporum f. sp. cucumarinum)、23株镰孢菌属(Fusarium spp.)真菌和分离自土壤的20株真菌、6株细菌和7株放线菌为材料, 采用化学裂解法提取总DNA, 进行PCR-RFLP和巢式PCR检测, 试验证明PCR-RFLP程序不能完全区分Fusarium属内不同种, 而巢式PCR对黄瓜尖镰孢菌具有特异性。运用优化的PCR-RFLP和巢式PCR检测程序对染病黄瓜组织进行了检测, 结果表明, 两种方法均可在接种发病早期(未显症时)检测出黄瓜枯萎病菌, PCR-RFLP在感病品种接种后3d即可检测到病原菌, 而巢式PCR在接种后5d才能检测到病原菌。
2008, 35(2):0215-0219.
摘要:从广西喀斯特地区台湾相思树采集根瘤并分离纯化获得15个根瘤菌株, 对其生物学特性进行了研究, 结果表明: 这些根瘤菌均具有典型的根瘤菌的个体形态特征。3-酮基乳糖反应、牛肉膏蛋白胨生长均呈阴性; 淀粉水解、柠檬酸盐利用等均呈阳性; 在BTB反应和石蕊牛奶反应均产酸; 都能利用磷酸二氢铵和所供试的7种糖类; 11个菌株能使硝酸盐还原; 有14个菌株能在3.0%和4.0%浓度的NaCl下生长良好或较好; 39℃下有14个菌株能生长; 有13个菌株在pH12条件下能生长, 4个菌株在pH4的酸性条件下能生长; 15个菌株都能在≤10%的CaCO3浓度下生长, 其中有11个菌株能在10%~30%的钙浓度内生长。表现出在喀斯特环境下, 根瘤菌的生理生化特性及抗逆性的多样性。
2008, 35(2):0220-0224.
摘要:试验研究了喷施光合细菌菌液对新型烟草品质的影响。化学成分分析结果表明, 在苗期和大田以1:200的比例对烟叶叶面喷施光合细菌菌液, 对新型烟草内在化学成分的含量及其谐调性具有显著的影响, 尤其能够同时降低烟碱和增加钾的含量。评吸结果显示, 香味独特, 余味纯净, 劲头适中, 更加呈现出新型烟草所具有的品质特征。
王 岭 , 田世民 , 高海霞 , 邹明强 , 蒋继志 , 崔 霞 , 胡秀丽 , 陈立本
2008, 35(2):0230-0234.
摘要:通过激光切割技术加工出硝酸纤维素膜小圆片并粘贴在已打孔的塑料胶条上, 制成包含8个圆片的NCM条(NCM test strip), 进一步在NCM条上建立了玉米细菌性枯萎病菌的Dot-ELISA检测方法。研究发现, 在NCM圆片上的Dot-ELISA检测灵敏度与点样量密切相关, 采用10 mL/点的加样量比通常的1 mL/点可提高检测灵敏度10-100倍;间接Dot-ELISA的检测灵敏度是双抗夹心dot-ELISA的10倍, 该结果进一步在微孔板ELISA的检测中得到证实。玉米细菌性枯萎病菌的改良Dot-ELISA检测是一种较为灵敏、快速、稳定、规范的实验方法, 为进一步研究该病菌的微流控芯片斑点免疫检测方法奠定了前期工作基础。
2008, 35(2):0235-0240.
摘要:假单胞菌 (Pseudomonas sp.) M18 是促进植物生长的根际细菌, 能产生吩嗪-1-羧酸 (PCA) 和藤黄绿菌素 (Plt) 两种不同的抗生素。根据生物信息学分析, 铜绿假单胞菌PA2572基因编码蛋白可能是一个双元调控系统的应答调节子。本研究从假单胞菌M18基因组中扩增出PA2572同源基因片段ppbR, 利用体外定点插入突变和同源重组技术构建了M18 的ppbR突变株M18P。研究结果表明, 突变株M18P在泳动能力和群集运动能力上有显著的下降。突变株合成PCA 的能力比野生型有显著的下降, 在发酵液中PCA积累量仅为野生型的50%。在KMB培养基中, 突变株Plt的积累量和野生型没有显著的差异。
郭 蓓 , 胡 磊 , 盖 颖 , 王喜智 , 陈雪梅 , 蒋湘宁
2008, 35(2):0241-0248.
摘要:从拟南芥幼苗中提取RNA, 通过RT-PCR克隆得到海藻糖酶基因后, 将其构建到原核高效表达载体pET30a(+)上并在大肠杆菌BL21菌株中进行高效诱导表达, 继而对纯化得到的海藻糖酶蛋白进行活性检测和酶学特性研究。实验结果表明, 植物源的海藻糖酶基因在异体大肠杆菌中能够高效表达, 纯化获得的海藻糖酶蛋白在试管条件下具有较高的海藻糖水解活性, 其活性最适温度为45℃。通过GC-MS分离检测, 可以明显地看到酶反应过程中底物海藻糖和产物葡萄糖的含量随反应时间变化的消长关系, 这充分证明克隆基因在大肠杆菌中的表达产物具有海藻糖酶的功能。
2008, 35(2):0249-0255.
摘要:帕金森症(Parkinson’s Disease, PD)是当今最为广泛的神经退行性疾病之一。研究显示, a-synuclein蛋白在帕金森症的发生过程中有着非常重要的作用。以酿酒酵母为模式系统, 通过调控a-synuclein蛋白在胞内的表达量或改变其它一些可能影响a-synuclein聚集状态的因素, 对a-synuclein蛋白在帕金森症的发生过程中可能的细胞毒性机制进行了研究。结果表明, a-synuclein蛋白的高水平表达会明显增强该蛋白因聚集所诱导的细胞毒性, 而且这种细胞毒性与细胞代谢状态明显相关; 超表达酿酒酵母分子伴侣YDR533C可以明显缓解a-synuclein蛋白异源表达对酵母生长的抑制。上述结果表明, 蛋白折叠与折叠过程中的质量控制在a-synuclein蛋白聚集过程中有着非常重要的作用。
2008, 35(2):0256-0260.
摘要:ACP (Acyl carrier protein, 酰基载体蛋白) 参与高度不饱和脂肪酸的PKS (Polyketide synthase) 生物合成途径。从Schizochytrium sp.FJU-512 cDNA文库中获得了ACP基因的cDNA克隆。该序列开放读码框全长429 bp, 编码142个氨基酸, 等电点为5.04, 具有4′-磷酸泛酰巯基乙胺(4′-PP)的结合位点。利用BamHⅠ/HindⅢ双酶切, 并连接到原核表达载体pET-30a, 构建了pET-30a/acp表达载体, 转化宿主菌E.coli BL21(DE3), IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表明该蛋白得到高效表达。
2008, 35(2):0261-0266.
摘要:利用重叠延伸PCR融合磷酸甘油激酶(phosphoglycerate kinase, PGK)启动子和酿酒酵母乙醇脱氢酶基因Ⅰ(alcohol dehydrogenaseⅠ, adh1), 将该融合片段插入带有G418抗性基因(KanMX)和loxP位点的pUG6质粒中, 并在adh1基因下游插入细胞色素c (Cytochrome c transcription, CYC1)终止子, 构建了酿酒酵母整合表达载体pUPGKAT。TthⅢⅠ内切酶线性化后转化酿酒酵母乙醇脱氢酶基因Ⅱ(adh2 )敲除菌株YS2-△adh2。根据酿酒酵母同源重组机制, 使adh1基因增加1个拷贝, 且其中1个拷贝置于PGK强启动子下游, 利用PGK启动子的调控成功实现adh1基因的超表达。厌氧发酵试验表明该重组菌株YS2- △adh2-adh1的乙醇产量较出发菌株提高了8.84%。
2008, 35(2):0267-0271.
摘要:真菌细胞壁几丁质的合成是一个复杂的过程, 其关键酶为几丁质合酶(CS)。近年来, 丝状真菌中的CS研究有了大的突破, 与酿酒酵母中只有3种CS不同, 丝状真菌中存在7种类别的CS。大部分临床和农业中重要的病原真菌都是丝状真菌, 文中对真菌中7种类别CS的结构和功能作了概述, 重点讨论了丝状真菌中重要的CS类别, 并介绍了CS作为抗真菌药物有效靶标的研究现状, 旨在为研究真菌CS及其抑制剂提供参考。
2008, 35(2):0272-0274.
摘要:放线菌药物的开发已取得了极其辉煌的成就, 对医疗事业的发展和人类健康做出了重大贡献。然而, 随着放线菌药物资源的长期开发和利用, 也面临诸多问题。如: 包袱沉重, 去重复难度极大, 因而投资周期长、耗资巨, 风险大; 药物开发赶不上病原菌抗药性的增加及不断出现的新疾病; 虽然未知放线菌甚多, 但发现难度大。为此, 提出了从化学、菌种和基因三方面开展放线菌药物研究的应对策略, 以解决限制放线菌药物资源持续利用和发展的瓶颈。
2008, 35(2):0275-0280.
摘要:单核细胞增生李斯特菌 (Listeria monocytogenes LM) 属于典型的细胞内寄生革兰氏阳性菌, 是WHO公布的四大食源性致病菌之一。LM不仅是人畜共患传染病李斯特菌病 (listeriosis) 的主要病原菌, 也是研究胞内感染和细胞介导的免疫应答的模式细菌。绝大多数LM毒力基因的转录表达受到PrfA蛋白的调控。本文简单介绍了LM侵染宿主细胞必需的毒力基因及其产物; 重点对毒力基因调节蛋白PrfA的结构和功能, PrfA调节毒力基因表达的主要方式最新进展进行了综述和讨论。
2008, 35(2):0286-0290.
摘要:基因强化通过强化降解基因在土著菌群中的水平迁移和传播, 促进土著降解菌群的进化, 改善基因工程菌生物强化作用的稳定性, 提高难降解污染物的生物去除效果。介绍了基因强化的原理-微生物群落内水平基因迁移, 讨论了基因载体、细胞接触条件和环境条件等影响基因强化的因素, 综述了目前基因强化在土壤生物修复和废水生物处理中的应用现状, 并提出了基因强化中存在的问题。
2008, 35(2):0291-0295.
摘要:简要介绍了植原体分类研究历史与现状, 综述了最新的植原体分类方法和植原体候选种的描述规则, 指出了我国在植原体分类鉴定方面与当今世界先进水平的差距及今后发展方向。
2008, 35(2):0299-0301.
摘要:工业微生物学单独作为教程的时间较短, 在教学内容和教学方法上, 还需经过多方面的改革探讨。从基础理论知识与科研, 实验教学及生产生活实践的有机结合等角度对教学内容改革进行了探讨;采用计算机辅助教学(CAI)模式, 把基于问题的学习(PBL)和基于案例的学习(CBS)的启发式教学方法相结合, 引入部分双语教学的方法, 对教学方法进行了改革。通过以上两方面的探讨实践, 学生对工业微生物学产生了较浓厚的兴趣, 达到了教改的目的。
2008, 35(2):0302-0305.
摘要:结合我们编著的《微生物学》教材, 阐述了讲好《微生物学》课程的动力、境界和手段, 指出对学科的热爱和兴趣是讲好微生物学的动力, 充分认识微生物的“共性”和“特性”, 是讲好微生物学的一种境界, 兴趣是最好的老师, 也是激发学生求知欲的重要手段。另外, 为了培养创新型人才, 作为教师不仅要“授人以鱼”, 而且更要“授人以渔”, 引导学生“知其所以然”。
2008, 35(2):0306-0310.
摘要:通过单因素分析, 确定最适于副溶血性弧菌VPJ33生长的pH、温度和盐度。在此基础上, 综合考虑3个因素对VPJ33生长的影响, 用Design-Expert软件进行响应面分析, 优化VPJ33的培养条件得到了菌体生长模型, 以及取得模型最优值时各因素的水平。结果表明, VPJ33的最优培养条件为:pH 8.41、温度34.1℃和盐度2.47%; 菌体生长过程中, pH和盐度以及pH和温度对VPJ33生长的交互作用显著, 盐度和温度对VPJ33生长的交互作用不显著。菌体生长模型达到显著水平, 可以对VPJ33在不同条件下的生长情况进行分析和预测。