摘要:α-L-鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase, EC 3.2.1.40)能特异性地水解许多糖苷类物质, 如柚皮苷(Naringin)、芦丁(Rutin)、橙皮苷(Hesperidin)等的末端α-L-鼠李糖基可用于去除柑桔类果汁的苦味、消除桔子汁的橙皮苷结晶、生物转化生产L-鼠李糖、切除糖苷类药物原料末端的L-鼠李糖以及改善酿造食品的风味等[1?3]。国外已有利用微生物发酵生产α-L-鼠李糖苷酶的研究, 但尚未有工业化生产的报道, 主要原因在于缺乏适合于工业化生产的高产菌株。
虽然很多学者对α-L-鼠李糖苷酶高产菌株选育进行了研究, 但由于缺乏有效的筛选模型, 菌种选育效率低, 进展缓慢。本刊2009 年第7 期介绍了陈华根和蔡慧农发表的论文“黑曲霉α-鼠李糖苷酶高产菌株的选育”[4], 作者利用α-L-鼠李糖苷酶高产菌株的透明圏筛选法有效地提高了α-L-鼠李糖苷酶高产育种的效率,选育得到了高产α-L-鼠李糖苷酶的黑曲霉DB056 菌株, 为实施高产育种及提高α-L-鼠李糖苷酶的发酵产量提供了基础。
最近, 蔡慧农等对黑曲霉DB056 菌株的α-L-鼠李糖苷酶发酵、分离纯化、酶制剂及应用技术进行了系统研究：(1) 发现黑曲霉DB056 在以柚皮苷为碳源的培养基中同时发酵产生了α-L-鼠李糖苷酶与β-D-葡萄糖苷酶, 这两个酶紧密结合形成柚苷酶[5]；(2) 优化了黑曲霉DB056 发酵的培养基和培养条件, 在200 L 发酵罐上中试发酵α-L-鼠李糖苷酶获得了高产, 酶的产量达到1 400 U/mL 发酵液[6]；(3) 制备了方便使用的酶制剂, 其活力不低于10 000 U/g 干粉, 可在4 °C 长期贮存；(4) 用α-L-鼠李糖苷酶对琯溪蜜柚果汁进行脱苦,在酶加量为10 U/mL 的条件下40 °C 处理60 min, 苦味就降低到阈值以下[7]。这些研究不仅为α-L-鼠李糖苷酶的工业化生产奠定了基础, 而且也为食品加工行业提供了一种新的酶, 具有重要的应用前景。
