细菌荧光酶报告基因载体构建及在Hela细胞中的表达*

摘要:

采用ＰＣＲ点突变技术，构建含有细菌荧光酶融合ｌｕｘＡＢ报告基因的重组哺乳动物载体ｐｃＤＮＡ３－ｌｕｘＡＢ，脂质体ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染和Ｇ４１８抗性筛选稳定转染的Ｈｅｌａ细胞。ＰＣＲ和酶切电泳证明构建的正确性；经稳定转染ｐｃＤＮＡ_３－ｌｕｘＡＢ的Ｈｅｌａ细胞，用发光仪可测得较强的发光强度（最大值为４．１２ｍＶ／４０μｇ细胞总蛋白粗提物）。而亲本及ｐｃＤＮＡ_３稳定转染的Ｈｅｌａ细胞则在本底值范围，ｐｃＤＮＡ_３<

关键词:luxAB基因; 报告基因; 细菌荧光酶; PCR; 稳定转染;

Abstract:

Key words:luxAB基因; 报告基因; 细菌荧光酶; PCR; 稳定转染;