摘要:参照已知的L－山梨酮脱氢酶基因序列，合成了两个引物序列，以AcetobacterliqueficiensIF012258的染色体DNA为模板进行PCR反应，克隆得到了L－山梨酮脱氢酶基因，经酶切验证与预期结果相同，序列测定结果也与已知序列一致。采用PCR方法在此基因的两端加上了E．coRI和HindⅢ两个酶切位点，经E．coRI和HindⅢ酶切后去掉了两端的多余序列后，将此片段连接到pKKH上，经诱导无蛋白表达，采用RcaI酶切启动子端，对载体pKKH则采用Mcol酶切，使表达载体的SD序列
