脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽序列的亲和筛选*

摘要:

应用噬菌体展示肽库技术,以重组的脑膜炎大肠杆菌致病蛋白IbeA作为靶分子,经过吸附-洗脱-扩增-再吸附的亲和筛选,随机挑选亲和力强的噬菌体克隆,进行ELISA、竞争抑制实验和序列测定。结果显示,经3轮淘选后,间接ELISA鉴定得到高亲和性结合IbeA蛋白的15个阳性克隆。竞争抑制实验结果表明,游离IbeA蛋白能竞争抑制噬菌体结合肽克隆与固相包被的IbeA蛋白的结合,其抑制作用随游离IbeA蛋白浓度的降低而减弱。测序结果得到5种阳性噬菌体克隆展示肽序列。上述结果提示以脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白为靶筛选所获得

关键词:噬菌体展示肽库; 脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白; 结合肽; 亲和筛选;

Abstract:

Key words:噬菌体展示肽库; 脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白; 结合肽; 亲和筛选;