以thyA基因为选择压力非抗性质粒载体的构建*

摘要:

以干酷乳杆菌Ｌ．Ｃａｓｅｉ３４１０３染色体ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术扩增胸苷酸合成酶（Ｔｈｙｍｉｄｙ－ｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｔｈｙＡ）基因，回收纯化。选择以红霉素抗性为选择压力的可以在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭表达的质粒ｐＷ４２５ｅ为基本质粒，以ｔｈｙＡ基因取代红霉素基因，获得重组载体并鉴定。此重组载体可以对ｔｈｙＡ基因缺陷的大肠杆菌Ｅ．Ｃｏｌｉ Ｘ５１和嗜酸乳杆菌ＤＯＭＬａＳ １０７进行功能弥补。进而构建了以ｔｈｙＡ基

关键词:thyA基因; 选择压力; 穿梭载体; 构建;

Abstract:

Key words:thyA基因; 选择压力; 穿梭载体; 构建;