2023, Vol. 50扩展功能
文章信息
- 车建美, 赖恭梯, 赖呈纯, 陈冰星, 陈倩倩, 林思连, 叶鹏鹏, 刘波
- CHE Jianmei, LAI Gongti, LAI Chengchun, CHEN Bingxing, CHEN Qianqian, LIN Silian, YE Pengpeng, LIU Bo
- 芽孢杆菌FJAT-55034的鉴定、生长特性及对梨轮纹病菌的抑菌活性
- Bacillus sp. FJAT-55034: identification, growth characteristics, and antagonistic effect on Botryosphaeria dothidea causing pear ring rot
- 微生物学通报, 2023, 50(11): 4925-4937
- Microbiology China, 2023, 50(11): 4925-4937
- DOI: 10.13344/j.microbiol.china.230225
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文章历史
- 收稿日期: 2023-03-23
- 接受日期: 2023-04-12
- 网络首发日期: 2023-05-26
2. 福建省农业科学院农业工程技术研究所, 福建 福州 350002;
3. 泉州村上小镇农业科技有限公司, 福建 泉州 362500;
4. 德化县农业科学院研究所, 福建 泉州 362500
2. Institute of Agricultural Engineering and Technology, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350002, Fujian, China;
3. Quanzhou Cunshang Town Agricultural Technology Limited Company, Quanzhou 362500, Fujian, China;
4. Dehua Institute of Agricultural Sciences, Quanzhou 362500, Fujian, China
由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的梨轮纹病是梨种植过程中的主要病害之一[1]。该病害在我国南北方20多个省份均发病，南方发病率更高，严重时枝干发病率达100%，烂果率甚至超过80%[2]，造成无法挽回的损失，导致果实减产、农民减收[3]。
目前梨轮纹病的防治主要依赖化学农药，包括甲基硫菌灵、甲硫酮和多菌灵等[4]。种植户为追求产量，用药量盲目增加，容易导致病原菌抗药性增强[5]。因此，生物防治是植物病害防治的发展热点方向之一[6-7]。芽孢杆菌因具有繁殖速度快、分布广和耐酸碱盐等特点，近年来在植物病害防治领域应用广泛[8-10]。郝金辉等[11]筛选得到的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵上清液对梨黑斑病菌互隔交链孢(Alternaria alternata)菌丝生长和孢子萌发均有显著抑制作用。耐盐芽孢杆菌(Bacillus halotolerans) LDFZ001在PDA培养基上能够显著抑制小麦纹枯病菌(Rhizoctonia solani)菌丝生长[12]。目前用于梨轮纹病生物防治的芽孢杆菌不多，解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) L-1能够在梨伤口处成功定殖，而且在贮藏期间一直维持在较高水平，对梨轮纹病菌的活体抑制率达到76.6%[13]。枯草芽孢杆菌sf628可以抑制梨轮纹病病斑的扩展，抑制率为60.0%[14]。近年来，贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)作为一种潜在的生防菌在许多国家得到广泛应用[15]。贝莱斯芽孢杆菌SM905对铁皮石斛胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)的防效优于苯醚甲环唑[16]。贝莱斯芽孢杆菌Ba-0321具有较强的抗紫外线能力，对烟草根腐病菌(Fusarium oxysporum)的防治效果为81.0%，同时能够促进烟草根系发育和植株生长[17]。但目前关于贝莱斯芽孢杆菌应用于梨轮纹病的防治鲜见报道，而且由于梨在我国种植范围广、环境差异性大[18]，而生防菌的生长特性又与其环境适应性密切相关[19]，因此筛选适宜不同生态环境的菌株资源尤为必要。
本研究前期从葡萄叶片分离得到一株芽孢杆菌FJAT-55034，发现其对梨轮纹病菌具有较好的拮抗作用。因此，本研究通过形态学对该菌株进行观察，并结合分子生物学技术对该菌株进行鉴定，研究其生长特性，并分析其对梨轮纹病菌的抑制效果，旨在为进一步发掘梨主要病害生防菌株资源奠定基础，并为梨病害生防菌剂的应用提供参考。
1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株供试梨炭疽病菌(Colletotrichum fructicola)、梨腐烂病菌(Valsa mali var. pyri)、梨轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)和梨黑斑病菌(Alternaria alternata)均由江苏省农业科学院植物保护研究所李朝辉老师惠赠；供试病原菌枇杷炭疽病菌(Colletotrichum acutatum) FJAT-30256、龙眼焦腐病菌(Lasiodiplodia theobromae) FJAT-3586均为本实验室分离保存。
1.1.2 培养基LB液体培养基(g/L)：NaCl 5.0，酵母浸膏5.0，胰蛋白胨10.0，pH 7.0−7.2，121 ℃灭菌20 min。PDA培养基(g/L)：马铃薯葡萄糖琼脂培养基35.0，pH 7.0−7.2，121 ℃灭菌20 min。配制相应固体培养基时，加入17 g/L琼脂粉。
1.1.3 主要试剂和仪器细菌基因组DNA提取试剂盒，Bioteke公司；2×Taq Mix，北京天根生物有限公司；API 50CH和API 20E，BioMerieux公司。扫描电镜，JEOL公司；奥林巴斯显微镜，Olympus公司；PCR仪、电泳仪和凝胶成像仪，Bio-Rad公司。
1.2 拮抗菌株的鉴定 1.2.1 形态特征观察在LB培养基上划线接种甘油保藏的菌株FJAT-55034，30 ℃培养48 h，观察菌落形态、颜色等特征，并于扫描电镜下观察菌体形态。
1.2.2 生理生化特征生理生化特征采用API 50CH和API 20E进行检测。将菌株FJAT-55034于LB培养基上活化，挑取单菌落于LB液体培养基中，30 ℃、180 r/min培养24 h。将菌株FJAT-55034发酵液分别滴加于API 20E和API 50CH试剂条各微量生化管内，30 ℃培养24 h，观察并记录各生化管中反应现象。
1.2.3 16S rRNA基因扩增菌株FJAT-55034的基因组DNA按细菌基因组DNA提取试剂盒操作方法提取。引物为27F (5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)和1492R (5′-TACGACTTAACCCCAATCGC-3′)[20]。PCR反应体系(25.0 μL)：2×Taq Mix 12.5 μL，正、反向引物(10 μmol/L)各0.5 μL，基因组DNA (1 ng/μL) 1.0 μL，去离子水补足25.0 μL。PCR反应条件：94 ℃ 4 min；94 ℃ 1 min，50 ℃ 1 min，72 ℃ 1 min，35个循环；72 ℃ 10 min。PCR产物交由上海铂尚生物技术有限公司测序，测序结果利用BLAST在线工具与数据库的模式菌株序列进行同源性比对，采用MEGA 7.0软件，使用邻接法构建菌株的系统发育树。
1.3 拮抗菌株的生长特性 1.3.1 生长曲线挑取菌株FJAF-55034单菌落于LB，30 ℃、180 r/min培养过夜按1%接种量将培养过夜的FJAT-55034发酵液加入LB培养基中，于30 ℃、180 r/min振荡培养，不同时间(0、2、4、6、8、10、12、24、26和28 h)取样，采用紫外分光光度计测定600 nm吸光值。每处理3次重复。
1.3.2 温度对拮抗菌生长的影响按1%接种量将培养过夜的FJAT-55034发酵液加入LB培养基中，置于10、20、30、40和50 ℃，180 r/min振荡培养24 h后取出，测定600 nm吸光值。每处理3次重复。
1.3.3 pH对拮抗菌生长的影响将LB液体培养基的pH值分别调至1.0、3.0、5.0、7.0、9.0和11.0，按1%接种量将培养过夜的FJAT-55034发酵液加入不同pH的培养基中，置于30 ℃、180 r/min振荡培养24 h后取出，测定600 nm吸光值。每处理3次重复。
1.3.4 耐盐性按1%接种量将培养过夜的FJAT-55034发酵液加入LB培养基中，NaCl添加浓度分别为0.1%、0.5%、1%、2%、5%、10%和20%，置于30 ℃、180 r/min振荡培养24 h后取出，测定600 nm吸光值。每处理3次重复。
1.4 拮抗菌株对不同病原菌的抑制作用在LB液体培养基中接入拮抗菌株FJAT- 55034单菌落后，30 ℃、180 r/min振荡培养2 d后取出。将活化的不同病原真菌接种于PDA培养基上，28 ℃培养5 d，取5 mL无菌水轻轻冲洗培养5 d的不同病原真菌，制备孢子悬浮液(1.0×106个/mL)。取2 mL真菌孢子悬浮液与20 mL PDA培养基混匀，待其凝固后，采用打孔器打孔(直径6 mm)，加入50 μL拮抗菌发酵液(2.0×108 CFU/mL)，30 ℃培养48 h，采用十字交叉法测量抑菌圈直径。试验重复3次。
1.5 拮抗菌株对梨轮纹病菌生长的影响 1.5.1 对菌丝生长量的影响在LB液体培养基中接入FJAT-55034单菌落后，30 ℃、180 r/min培养2 d，取出。在50 mL PDB培养基中接种一块1 cm2大小的梨轮纹病菌，然后再按照2% (体积分数)接种量接入菌株FJAT-55034发酵液(2.0×108 CFU/mL)，30 ℃、100 r/min培养7 d，以LB培养基作为对照。观察菌丝生长状态，8 000 r/min离心15 min，去掉上清液，收集菌丝，烘干并称重。每个处理3个重复。
1.5.2 对菌丝形态的影响将梨轮纹病菌在PDA培养基上培养，待菌株长满平板，用打孔器打6 mm菌饼置于PDA培养基中央，在其两侧接种菌株FJAT-55034，以LB培养基作为对照。30 ℃培养5 d后观察该菌株对病原真菌的抑制情况，并挑取边缘菌丝于奥林巴斯显微镜下观察形态。
1.6 拮抗菌株对梨轮纹病斑扩展的抑制效果测定取新鲜的香梨，70%酒精表面消毒后，无菌水清洗3次，用灭菌牙签在每个果实表面刺伤6 mm左右的伤口，取6 mm的轮纹病菌饼贴于该伤口上，30 ℃培养24 h后取下菌饼，于菌株FJAT-55034发酵液(2.0×108 CFU/mL)中浸泡20 min后取出，晾干。以LB培养基处理为对照，每个处理7个梨。将不同处理的梨置于30 ℃培养3 d后，每天测定病斑的直径。每个处理3个重复。抑制率(%)=[(对照果斑面积−处理果斑面积)/对照果斑面积]×100，果斑面积=π(d/2)2，d为果实果实病斑直径平均值。
1.7 数据统计与分析采用Microsoft Excel 2007进行计算和作图，试验数据差异显著性通过DPS7.05软件进行邓肯氏新复极差法检测。
2 结果与分析 2.1 菌株FJAT-55034的鉴定结果 2.1.1 形态特征菌株FJAT-55034在LB培养基上培养48 h后，菌落乳白色，不透明，表面干燥，菌落最初生长为近圆形，继而边缘不规则扩散(图 1A)。扫描电镜观察发现，菌体呈短杆状，表面附着一层荚膜，菌体大小为(0.8×1.5) μm−(2.0×2.5) μm (图 1B)。
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| 图 1 菌株FJAT-55034的菌落形态(A)和菌体形态(B) Figure 1 Colony morphology (A) and cell morphology (B) of strain FJAT-55034. |
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API 20E检测表明，菌株FJAT-55034精氨酸水解酶试验为阳性，邻苯硝基-半乳糖苷酶、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和苯丙氨酸脱氨酶反应均为阴性，能利用柠檬酸盐，不产硫化氢和吲哚，脲酶和V-P试验为阴性，能水解明胶，能利用葡萄糖发酵产酸，不能利用蔗糖、甘露醇、肌醇、山梨醇、鼠李糖、苦杏仁苷、密二糖和阿拉伯糖产酸(表 1)。API 50CH检测49种碳水化合物，菌株FJAT-55034能够利用甘油、d-阿拉伯糖、l-阿拉伯糖、核糖、d-木糖、l-木糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、肌醇、甘露醇、山梨醇、α-甲基-d-葡萄糖苷、N-乙酰-葡糖胺、苦杏仁苷、熊果苷、七叶灵、柳醇、纤维二糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、淀粉、肝糖和龙胆二糖，不能利用其余23种碳水化合物(表 2)。
| 项目 Item |
结果 Result |
项目 Item |
结果 Result |
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| VP反应Voges-Proskauer test | − | 阿拉伯糖l-arabinose | − | |
| 苯丙氨酸脱氨酶Phenylalanine deaminase | − | 甘露醇Mannitol | − | |
| 精氨酸水解酶Arginine hydrolase | + | 肌醇Inositol | − | |
| 赖氨酸脱羧酶Lysine decarboxylase | − | 苦杏仁苷Amygdalin | − | |
| 邻苯硝基-半乳糖苷酶 O-Nitrophenyl-β-d-galactopyranoside enzyme |
− | 密二糖Melibiose | − | |
| 硫化氢Hydrogen sulfide | − | 葡萄糖Glucose | + | |
| 明胶液化Gelatin hydrolysis | + | 山梨醇Sorbitol | − | |
| 鸟氨酸脱羧酶Ornithine decarboxylase | − | 鼠李糖Rhamnose | − | |
| 尿素酶Urease | − | 吲哚Indole | − | |
| 柠檬酸盐利用Sodium critrate | + | 蔗糖Sucrose | − | |
| +：阳性；−：阴性. 下同 +: Positive; −: Negative. The same below. |
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| 项目 Item |
结果 Result |
项目 Item |
结果 Result |
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| 甘油Glycerol | + | 柳醇Saligenin | + | |
| 赤癣醇Erythritol | − | 纤维二糖Cellobiose | + | |
| d-阿拉伯糖d-arabinose | + | 麦芽糖Maltose | + | |
| l-阿拉伯糖l-arabinose | + | d-阿糖醇d-arabitol | − | |
| d-木糖d-xylose | + | d-来苏糖d-lyxose | − | |
| l-木糖l-xylose | + | d-松二糖d-turanose | − | |
| β-甲基-d-木糖苷β-methyl-d-xyloside | − | d-塔格糖d-tagatose | − | |
| 阿东醇Adonitol | − | d-岩糖d-fucose | − | |
| 半乳糖Galactose | − | l-岩糖l-fucose | − | |
| 半乳糖醇Dulcitol | − | 淀粉Starch | + | |
| 甘露醇Mannitol | + | 肝糖Glycogen | + | |
| 甘露糖Mannose | + | 海藻糖Trehalose | + | |
| 果糖Fructose | + | 菊糖Inulin | − | |
| 核糖Ribose | + | 龙胆二糖Gentiobiose | + | |
| 肌醇Inositol | + | 蜜二糖d-melibiose | − | |
| 葡萄糖Glucose | + | 棉子糖Raffinose | − | |
| 山梨醇Sorbitol | + | 木糖醇Xylitol | − | |
| 山梨糖Sorbose | − | 乳糖Lactose | + | |
| 鼠李糖Rhamnose | − | 松三糖Melizitose | − | |
| α-甲基-d-甘露糖苷α-methyl-d-mannose glycosides | − | 蔗糖Sucrose | + | |
| α-甲基-d-葡萄糖苷α-methyl-d-glucoside | + | l-阿糖醇l-arabitol | − | |
| 七叶灵Esculin | + | 葡萄糖酸盐Gluconate | − | |
| 熊果苷Arbutin | + | 5-酮基-葡萄糖酸盐5-keto-d-gluconate | − | |
| 苦杏仁苷Amygdalin | + | 2-酮基-葡萄糖酸盐2-keto-d-gluconate | − | |
| N-乙酰-葡糖胺N-acetylglucosamine | + |
菌株FJAT-55034与模式菌株贝莱斯芽孢杆菌BCRC17467的序列相似性最高，达到99.4%。将菌株的16S rRNA基因序列提交到GenBank数据库，登录号为ON567374。基于16S rRNA基因序列采用邻接法构建系统发育树，结果如图 2所示，菌株FJAT-55034与贝莱斯芽孢杆菌聚成一个分支。综合其形态特征、生理生化特征及系统发育分析的结果，将菌株FJAT-55034鉴定为贝莱斯芽孢杆菌。
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| 图 2 基于16S rRNA基因序列构建的菌株FJAT-55034的系统发育树 Figure 2 Phylogenetic trees of the strain FJAT-55034 and other Bacillus sp. strains. 括号内序号为该菌株GenBank登录号；标尺0.005代表序列偏差值；内部节点数字为支持度，用于代表该分支结构的可靠程度 The serial number in brackets is the GenBank accession number of the strain; The value of 0.005 represents the sequence deviation value; The number of internal nodes is support value, which represents the reliability of the branch structure. The same below. |
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菌株FJAT-55034的生长起始期为0−4 h，之后进入对数生长期(4−24 h)，菌株生长迅速，24 h后进入稳定生长期(图 3)。
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| 图 3 菌株FJAT-55034的生长曲线 Figure 3 Growth curve of strain FJAT-55034. |
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菌株FJAT-55034在20‒50 ℃均能够生长，其最适生长温度为30 ℃，OD600值为1.3 (图 4)。该菌株对高温的耐受性比低温更强，其在50 ℃的OD600值为0.5，在10 ℃的OD600值为0.1。
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| 图 4 温度对菌株FJAT-55034生长的影响 Figure 4 Effect of temperature on the growth of strain FJAT-55034. 不同小写字母代表不同处理间结果差异显著(P < 0.05). 下同 Different lowercase letters represent significant difference among the treatments (P < 0.05). The same below. |
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菌株FJAT-55034在pH 5.0−9.0均可以生长，最适生长pH 7.0，其OD600值为1.1。pH值小于5.0或者大于9.0均不利于该菌株的生长(图 5)。
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| 图 5 pH值对菌株FJAT-55034生长的影响 Figure 5 Effect of pH value on the growth of the strain FJAT-55034. |
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NaCl添加量为0−5%时，该菌株均能够较好地生长，在不添加NaCl、添加0.5%和1%的NaCl培养基中的生长量无显著差异，其OD600值分别为1.4、1.3和1.4。NaCl添加量高于10%时不利于该菌株的生长(图 6)。
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| 图 6 NaCl对菌株FJAT-55034生长的影响 Figure 6 Effect of NaCl on the growth of the strain FJAT-55034. |
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菌株FJAT-55034对6种病原真菌均具有较好的抑制作用，抑菌圈直径范围为19.8−29.1 mm (图 7)。该菌株对梨轮纹病菌的抑制作用最好，抑菌圈直径为29.1 mm；对枇杷炭疽病菌的抑菌圈直径最小，为19.8 mm。
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| 图 7 菌株FJAT-55034对不同病原真菌的抑制作用 Figure 7 Inhibition effects of strain FJAT-55034 on different fungi. |
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菌株FJAT-55034可以明显抑制梨轮纹病菌菌丝的生长(图 8)。菌株FJAT-55034处理组的菌丝干重为0.3 g，显著低于对照组的1.5 g，其对梨轮纹病菌菌丝生长的抑制率为77.2%。
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| 图 8 菌株FJAT-55034对梨轮纹病菌菌丝生长的影响 Figure 8 Effect of strain FJAT-55034 on mycelial growth of Botryosphaeria dothidea. A：对照组. B：处理组 A: Control group. B: Treatment group. |
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菌株FJAT-55034和梨轮纹病菌对峙培养5 d后，对照组菌丝长满整个平板(图 9A)，而菌株FJAT-55034处理组的菌丝则被抑制无法生长(图 9B)。取边缘的菌丝进行显微镜观察发现：对照组菌丝细长，顶端无膨大(图 9C)；处理组菌丝较粗，顶端膨大呈泡状(图 9D)。
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| 图 9 菌株FJAT-55034对梨轮纹病菌丝形态的影响 Figure 9 The growth of the mycilium of Botryosphaeria dothidea treated with bacterial strain FJAT-55034. A、C：对照组. B、D：处理组 A, C: Control group. B, D: Treatment group. |
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接种3 d后，对照组的病斑直径为13.8 mm，处理组病斑直径为8.5 mm，显著性差异不大(表 3和图 10)；接种5 d后，对照组的病原菌正常生长，病斑直径分别为27.4、33.7和39.8 mm；而处理组病原菌生长受到不同程度的抑制，菌落直径分别为16.0、20.6和25.0 mm，菌株FJAT-55034对梨轮纹病菌的抑制率分别为66.0%、62.6%和60.4%。
| 培养时间 Cultural time (d) |
病斑直径 Lesion dimeter (mm) |
抑制率 Inhibition rates (%) |
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| 处理组 Treatment group |
对照组 Control group |
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| 3 | 8.5±1.3a | 13.8±1.9a | 62.0 | |
| 4 | 11.8±2.1a | 20.2±2.5a | 65.9 | |
| 5 | 16.0±2.3a | 27.4±2.6b | 66.0 | |
| 6 | 20.6±2.6a | 33.7±3.3b | 62.6 | |
| 7 | 25.0±2.6a | 39.8±3.1b | 60.4 | |
| 不同小写字母代表不同处理间结果差异显著(P < 0.05) Different lowercase letters represent significant difference among the treatments (P < 0.05). |
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| 图 10 菌株FJAT-55034对梨轮纹病斑扩展的抑制作用 Figure 10 Inhibitory effect of strain FJAT-55034 on pear ring rot lesion expansion. |
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贝莱斯芽孢杆菌因具有无残留、环境友好、广谱的抗菌活性、促生作用等优点，在农业种植领域的应用日益广泛[15]。Mosela等[21]分离获得贝莱斯芽孢杆菌03可提高玉米和大豆产量。贝莱斯芽孢杆菌SDTB038对番茄镰孢菌冠腐病和根腐病均有较好的防治效果[10]。但目前在实际应用过程中，贝莱斯芽孢杆菌易受到寄主、气候、土壤和水质等多种因素的影响，干扰菌株的生长繁殖进而影响其生防效果[22]，因此迫切需要分离更多环境适应性强的菌株资源。本研究分离得到的拮抗贝莱斯芽孢杆菌FJAT-55034在20−50 ℃ (最适温度30 ℃)和pH 5.0−9.0 (最适pH值7.0)均能够生长，我们的研究结果与高艳侠等[23]的相似，他们发现贝莱斯芽孢杆菌LF01菌株的最适生长温度为30 ℃，最适pH 7.0。但与杨迪等[24]的研究结果有所不同，他们分离的2株贝莱斯芽孢杆菌最适生长温度均为31 ℃，最适生长pH值均为5.5。不同的贝莱斯芽孢杆菌生长的最高温度有所不同，贝莱斯芽孢杆菌LF01菌株最高生长温度37 ℃[23]，而我们分离的贝莱斯芽孢杆菌FJAT-55034对高温条件的耐受性更强，50 ℃条件下也能够生长，且该菌株在NaCl添加量为0−5%时均能够较好生长，但浓度升高时，生长量下降。朱亚珠等[25]也发现贝莱斯芽孢杆菌SW5在NaCl质量浓度为0−5 g/100 mL时的生长速度呈上升趋势，5−20 g/100 mL时生长速度呈下降趋势。然而贝莱斯芽孢杆菌LF01对盐的耐受性则较弱，其最适盐度为5‰[23]。因此，拮抗贝莱斯芽孢杆菌FJAT-55034耐高温、耐盐碱，有望作为环境适应性强的菌株备选资源。
随着生活水平的提高，人们对优质安全梨的需求越来越旺盛[24]。化学农药的大量使用对梨果实品质的污染越来越严重，因此病害防治与农药污染的矛盾亟待解决[24]。相对安全、无残留和环境友好的微生物菌剂越来越受到重视，成为国际绿色农药发展的重点[26]。本研究分离得到的一株拮抗贝莱斯芽孢杆菌FJAT-55034，对6种常见果树病原真菌均具有较强的抑制作用，可为果树真菌病害防治的微生物菌剂开发提供新资源，具有较好的应用前景。该菌株可抑制梨轮纹病菌丝的生长，抑制率达到77.2%，且能够有效抑制梨果实轮纹病斑的扩展，抑制率为66.0%，高于枯草芽孢杆菌sf628的抑制率[14]。由于目前关于贝莱斯芽孢杆菌用于梨轮纹病防治方面鲜见报道，为加快其产业化应用，尚需开展不同生态环境梨种植区的小区试验和大田示范，确定其环境适应性和防病效果。
生防菌常常会抑制菌丝生长，对菌丝有致畸效果[27]。菌株FJAT-55034处理后的梨轮纹病菌丝明显变粗，顶端膨大呈泡状，这一结果与郝金辉等[11]的研究结果一致。张倩等[28]通过扫描电镜观察也发现，经与贝莱斯芽孢杆菌KT菌株共培养后，匍枝根霉菌丝和孢子形态会发生扭曲。研究表明，贝莱斯芽孢杆菌主要通过脂肽等抗菌代谢产物、诱导植物系统抗性、产生生长激素促进植物生长、竞争和生态位定殖调控等机制发挥生防作用[29-30]，因此推测菌株FJAT-55034很有可能通过产生某些活性物质抑制梨轮纹病菌生长，其具体的抑菌机制有待进一步深入研究。
综上所述，贝莱斯芽孢杆菌FJAT-55034对梨轮纹病菌具有较强的抑制作用，有望作为梨种植中病害防治的菌种资源。贝莱斯芽孢杆菌作为芽孢杆菌属的一个新种，在病害防控领域的应用越来越广泛，后续将通过宏基因组和转录组等分子生物学手段进一步探索该菌株对梨轮纹病菌的生防机制，为田间广泛应用提供理论基础。
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